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       本指導(dao)原(yuan)則旨在指導(dao)注(zhu)冊申請人準備及撰(zhuan)寫重組膠(jiao)原(yuan)蛋白創面(mian)敷料(liao)注(zhu)冊申報(bao)資料(liao)，同時也為技術審評部門審查注(zhu)冊申報(bao)資料(liao)提(ti)供參(can)考。

       本指導(dao)原則是(shi)(shi)對重組膠(jiao)原蛋白創面敷料產(chan)品(pin)的(de)一(yi)般要求，注(zhu)冊(ce)申(shen)請人應(ying)依據(ju)(ju)產(chan)品(pin)的(de)具體特(te)性(xing)(xing)確定其中內容是(shi)(shi)否適用(yong)(yong)，若不適用(yong)(yong)，需具體闡述理(li)由及相應(ying)的(de)科學依據(ju)(ju)，并依據(ju)(ju)產(chan)品(pin)的(de)具體特(te)性(xing)(xing)對注(zhu)冊(ce)申(shen)報(bao)資料的(de)內容進行充(chong)實和細(xi)化(hua)。

       本指導(dao)(dao)原則是供注冊(ce)申(shen)請人和技術審評(ping)人員使用的(de)指導(dao)(dao)性文件，但不包(bao)括(kuo)注冊(ce)審批所涉及的(de)行政事項(xiang)，亦不作為法(fa)規強(qiang)制(zhi)執行。如果有能(neng)夠滿(man)足相關(guan)法(fa)規要(yao)求的(de)其他方法(fa)，也可(ke)以采用，但需(xu)(xu)要(yao)提(ti)供詳細的(de)研(yan)究資料(liao)和驗(yan)證資料(liao)。需(xu)(xu)在遵循相關(guan)法(fa)規和強(qiang)制(zhi)性標準的(de)前提(ti)下使用本指導(dao)(dao)原則。

       本(ben)指(zhi)導原則是(shi)在現行法(fa)(fa)規、標(biao)準(zhun)體系以(yi)及當前(qian)認知水平下(xia)制定(ding)的(de)，隨著(zhu)法(fa)(fa)規和標(biao)準(zhun)的(de)不斷完善，以(yi)及科學(xue)技(ji)術的(de)不斷發展，本(ben)指(zhi)導原則相關內容也(ye)將適時進行調整。

一、適用范圍

本指導原則適(shi)用(yong)(yong)于按(an)第(di)二類醫療器械管理(li)的(de)(de)重組膠原蛋白(bai)(bai)創面敷料，其結(jie)構組成(cheng)(cheng)中(zhong)含有(you)重組膠原蛋白(bai)(bai)成(cheng)(cheng)分(fen)（不包括動物組織提取的(de)(de)膠原蛋白(bai)(bai)成(cheng)(cheng)分(fen)），用(yong)(yong)于非慢性(xing)創面及其周圍皮膚的(de)(de)護理(li)。產(chan)(chan)品(pin)(pin)(pin)通常為凝膠、液體(ti)、敷貼、膏狀(zhuang)等型式(shi)，包括一次性(xing)使(shi)(shi)用(yong)(yong)的(de)(de)產(chan)(chan)品(pin)(pin)(pin)和(he)開(kai)封后多次使(shi)(shi)用(yong)(yong)的(de)(de)產(chan)(chan)品(pin)(pin)(pin)，以無菌(jun)形(xing)式(shi)或非無菌(jun)形(xing)式(shi)提供。產(chan)(chan)品(pin)(pin)(pin)中(zhong)所含成(cheng)(cheng)分(fen)不具有(you)藥理(li)學(xue)作用(yong)(yong)，不可被人體(ti)吸收。對(dui)產(chan)(chan)品(pin)(pin)(pin)分(fen)類和(he)屬性(xing)不明確的(de)(de)，需(xu)申(shen)請產(chan)(chan)品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)分(fen)類和(he)屬性(xing)界定。

二、注冊審查要點

（一）監管信息

注冊(ce)申請(qing)人應提(ti)供申請(qing)表、既(ji)(ji)往溝通記錄（如不適(shi)用，應當明確聲(sheng)明申報(bao)(bao)產品沒有既(ji)(ji)往申報(bao)(bao)和/或申報(bao)(bao)前溝通）、關聯文件（如主文檔授權信）及其他管理信息等。

1、申請表 

1.1產品名稱

產品名(ming)(ming)稱應符合《醫療器械通用名(ming)(ming)稱命名(ming)(ming)規則》等相關(guan)法規、規范性文件的(de)要求。產品名(ming)(ming)稱的(de)材(cai)(cai)料部分統一為“重(zhong)(zhong)組(zu)(zu)膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)”，如重(zhong)(zhong)組(zu)(zu)膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)凝膠(jiao)敷(fu)料、重(zhong)(zhong)組(zu)(zu)膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)創面敷(fu)貼等。除非有(you)充分資料證明(ming)重(zhong)(zhong)組(zu)(zu)膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)原材(cai)(cai)料的(de)結構特征等能夠給申(shen)報(bao)產品功能帶來額外(wai)獲益，產品名(ming)(ming)稱不(bu)區(qu)分具體(ti)材(cai)(cai)料特征。

1.2管理類別、分(fen)類編碼(ma)

申報產品中所含的重組(zu)膠原蛋(dan)白（不包括(kuo)動(dong)物(wu)組(zu)織提取的膠原蛋(dan)白成分(fen)(fen)）等(deng)成分(fen)(fen)不具有藥(yao)理學作(zuo)用(yong)，不可(ke)被人體(ti)吸收時，按(an)第(di)二類醫(yi)(yi)療器(qi)械(xie)(xie)管理，參考(kao)《醫(yi)(yi)療器(qi)械(xie)(xie)分(fen)(fen)類目(mu)錄》中分(fen)(fen)類編碼為14注輸、護(hu)理和防(fang)護(hu)器(qi)械(xie)(xie)-10創(chuang)面(mian)敷(fu)(fu)料的第(di)二類醫(yi)(yi)療器(qi)械(xie)(xie)相關描(miao)述。根據不同的產品型式，二級產品類別可(ke)為-01創(chuang)面(mian)敷(fu)(fu)貼、-04凝膠敷(fu)(fu)料、-08液(ye)體(ti)、膏狀敷(fu)(fu)料等(deng)。

1.3注冊單元劃(hua)分的原(yuan)則和實例(li)

申報產品(pin)的(de)注冊單元原則上以產品(pin)的(de)技術原理、主要結構(gou)組(zu)成、性(xing)能指標(biao)和適(shi)用范圍為劃分(fen)依據，同時應滿足《醫(yi)療(liao)器械注冊單元劃分(fen)指導原則》相關要求。例如：

1.3.1凝膠(jiao)型、液體型、敷貼型等(deng)產品(pin)，主(zhu)要組成(cheng)成(cheng)分相同但配比(bi)不同，性能指標存在(zai)差異而影響產品(pin)安全有效性時，建議劃分為不同的(de)注冊單元。

1.3.2凝膠型、液體型等(deng)產品，主要組成成分和(he)配(pei)比相同，包裝(zhuang)材質不同（包裝(zhuang)對產品性能無影響(xiang)）時，如(ru)低硼硅西林瓶(ping)和(he)聚對苯二(er)甲(jia)酸乙二(er)醇酯(zhi)（PET）噴瓶(ping)，建(jian)議劃分為(wei)同一(yi)個注冊單元。

1.4型號規格

應明確申報產(chan)品的型號規格。

1.5結構及組成

結構(gou)及(ji)組(zu)成中組(zu)分(fen)(fen)名稱應(ying)規范。產(chan)(chan)品(pin)(pin)所含成分(fen)(fen)可(ke)能(neng)涉(she)及(ji)很多種(zhong)類，但所含成分(fen)(fen)不應(ying)具有藥理學(xue)作用，不可(ke)被(bei)人體吸收。產(chan)(chan)品(pin)(pin)結構(gou)及(ji)組(zu)成原(yuan)則上不體現重(zhong)(zhong)組(zu)膠原(yuan)蛋白原(yuan)材料(liao)的結構(gou)特(te)征、氨(an)基酸序列等相關信息（除非(fei)有充(chong)分(fen)(fen)資料(liao)證明(ming)重(zhong)(zhong)組(zu)膠原(yuan)蛋白原(yuan)材料(liao)的結構(gou)特(te)征等能(neng)夠給申報產(chan)(chan)品(pin)(pin)功能(neng)帶來額外獲(huo)益）。

2.產品列表

應(ying)明確列出(chu)擬申報產品的型(xing)(xing)號(hao)、規格(ge)、結構及組成(cheng)、附(fu)件，以(yi)及每(mei)個規格(ge)型(xing)(xing)號(hao)的標識和(he)描(miao)述說明。

（二）綜述資料

1.產品描述

1.1工作原理

應描述申報(bao)產(chan)品(pin)的(de)工作原(yuan)理。如通(tong)過(guo)在(zai)創面(mian)表面(mian)形成保護層，起物理屏障作用。用于非(fei)慢性(xing)創面(mian)及(ji)其(qi)周圍皮膚的(de)護理。

1.2結構組成

申報產(chan)品(pin)含重(zhong)組(zu)膠(jiao)原(yuan)蛋白(bai)成分(fen)、成膜成分(fen)或(huo)高分(fen)子增稠成分(fen)、保濕潤滑成分(fen)、調節劑(ji)(ji)、乳化劑(ji)(ji)、防腐成分(fen)、緩沖(chong)劑(ji)(ji)、溶(rong)劑(ji)(ji)、基(ji)質載體(ti)等(deng)。產(chan)品(pin)中除重(zhong)組(zu)膠(jiao)原(yuan)蛋白(bai)外，其(qi)他常(chang)見的組(zu)成成分(fen)有：聚乙(yi)烯(xi)醇(chun)(chun)、聚乙(yi)二(er)醇(chun)(chun)、卡波姆、黃原(yuan)膠(jiao)、海藻(zao)酸鈉(na)(na)(na)、羧甲基(ji)纖(xian)維素(su)鈉(na)(na)(na)、甘油(you)、丙(bing)(bing)二(er)醇(chun)(chun)、海藻(zao)糖、聚乙(yi)烯(xi)吡咯烷酮、三乙(yi)醇(chun)(chun)胺、油(you)酸山梨(li)坦(tan)（司盤80）、鯨(jing)蠟硬脂醇(chun)(chun)、尼泊金(jin)甲酯鈉(na)(na)(na)、尼泊金(jin)丙(bing)(bing)酯鈉(na)(na)(na)、苯(ben)氧(yang)乙(yi)醇(chun)(chun)、羥苯(ben)甲酯、醋酸鹽緩沖(chong)劑(ji)(ji)、磷酸鹽緩沖(chong)劑(ji)(ji)、注射用水、純(chun)化水、無(wu)(wu)紡(fang)布貼等(deng)。產(chan)品(pin)通常(chang)為凝膠(jiao)、液(ye)體(ti)、敷貼、膏狀等(deng)型式(shi)，一(yi)次性(xing)使用或(huo)開封(feng)后多次使用，無(wu)(wu)菌形式(shi)或(huo)非無(wu)(wu)菌形式(shi)提(ti)供(gong)。

1.3型號規格

對于存(cun)在多種型號(hao)(hao)規格的(de)申報產(chan)品(pin)，應(ying)當明確各(ge)型號(hao)(hao)規格的(de)區別。應(ying)當采用對比表(biao)或帶(dai)有(you)說明性文字的(de)圖片、圖表(biao)，描述各(ge)種型號(hao)(hao)規格的(de)結(jie)構組(zu)成、功能、產(chan)品(pin)特征(zheng)和技術參數等內(nei)容。應(ying)清晰、準確表(biao)述產(chan)品(pin)的(de)全部型號(hao)(hao)/規格，型號(hao)(hao)/規格可以(yi)以(yi)裝量或尺寸(cun)等形式(shi)表(biao)述，例如：5mL、10g、15mL/瓶、20g/支、25g/貼等，不得出(chu)現(xian)(xian)“依據客戶需求可提供定制型號(hao)(hao)”。不得出(chu)現(xian)(xian)誤導或超出(chu)申報產(chan)品(pin)描述以(yi)及預期用途范疇的(de)表(biao)述內(nei)容。

1.4 包裝說明

說(shuo)明(ming)(ming)申報產(chan)品組成的(de)(de)(de)包裝信息，以(yi)(yi)無(wu)菌(jun)形式提供的(de)(de)(de)醫療器(qi)械(xie)，應當(dang)說(shuo)明(ming)(ming)其無(wu)菌(jun)屏障系統的(de)(de)(de)信息；以(yi)(yi)非(fei)無(wu)菌(jun)形式提供的(de)(de)(de)醫療器(qi)械(xie)，應當(dang)說(shuo)明(ming)(ming)保(bao)(bao)持(chi)其微生物指標的(de)(de)(de)包裝信息。說(shuo)明(ming)(ming)如何(he)確保(bao)(bao)最終使(shi)用者可清晰(xi)地辨(bian)識包裝的(de)(de)(de)完整(zheng)性。

1.5研發歷程

闡述申(shen)報(bao)產(chan)品(pin)(pin)的(de)研發背景和(he)目的(de)。如有參考的(de)同(tong)類產(chan)品(pin)(pin)或前(qian)代產(chan)品(pin)(pin)（如有），應(ying)當提供同(tong)類產(chan)品(pin)(pin)或前(qian)代產(chan)品(pin)(pin)的(de)信息，并說明選擇其作為(wei)研發參考的(de)原因(yin)。

1.6與同類和/或前代(dai)產(chan)品的參考和比較

列表比(bi)較說明(ming)申報(bao)產品與同類產品和/或前代產品（如有(you)）在(zai)工作(zuo)原理、結構組(zu)成、制(zhi)造材料、性能指標、作(zuo)用方式、適用范圍等方面的(de)異同。

2.適(shi)用范(fan)圍和禁忌證

2.1適用范圍

2.1.1應當描述申(shen)報(bao)產(chan)品(pin)的適用(yong)(yong)范圍，明(ming)確預期用(yong)(yong)途。如通過在創面表面形成保護層，起物理屏障作用(yong)(yong)。用(yong)(yong)于非(fei)慢性創面及(ji)其周圍皮膚的護理。如產(chan)品(pin)宣稱其他(ta)的適用(yong)(yong)范圍，應與臨床(chuang)評(ping)價結論一致，應有充分的臨床(chuang)數據支持。

2.1.2明(ming)確(que)(que)目(mu)標(biao)用(yong)戶及(ji)其(qi)操作或(huo)使用(yong)申(shen)報產品(pin)(pin)應當具備的技能/知識/培訓。明(ming)確(que)(que)申(shen)報產品(pin)(pin)為一次性使用(yong)或(huo)開(kai)封后多次使用(yong)。如適(shi)用(yong)，明(ming)確(que)(que)與申(shen)報產品(pin)(pin)聯合使用(yong)實現預期用(yong)途的其(qi)他產品(pin)(pin)的詳細信息(xi)。

對于已獲得批準的(de)(de)部件(jian)或配(pei)合使用(yong)的(de)(de)附件(jian)，應當提(ti)供注(zhu)(zhu)冊證(zheng)(zheng)編號和國家(jia)藥監局官方網站公布的(de)(de)注(zhu)(zhu)冊證(zheng)(zheng)信息(xi)。

2.2預期使用環境

應(ying)明確申報產品(pin)使(shi)用場(chang)所要求，如醫療機構、家(jia)庭等，明確使(shi)用環境要求，如需要無(wu)菌(jun)/非無(wu)菌(jun)操作的非慢性創面護(hu)理等。

2.3適用人群

應詳述申報產品(pin)的適用人群(qun)。

2.4禁忌證

應說(shuo)明(ming)(ming)(ming)申報產(chan)品臨床(chuang)應用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)禁忌證，應當明(ming)(ming)(ming)確說(shuo)明(ming)(ming)(ming)申報產(chan)品不(bu)適宜應用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)特(te)定的(de)(de)人(ren)群或(huo)特(te)定情況等信息，如(ru)：對(dui)原材料過敏(min)者禁用(yong)(yong)(yong)，對(dui)不(bu)明(ming)(ming)(ming)確過敏(min)者慎用(yong)(yong)(yong)等。如(ru)適用(yong)(yong)(yong)，通過風險/受益(yi)評(ping)估后，針對(dui)某些疾(ji)病(bing)、情況或(huo)特(te)定的(de)(de)人(ren)群（如(ru)兒(er)童、老年人(ren)、孕婦及哺乳期婦女、過敏(min)體質人(ren)群），認(ren)為不(bu)推(tui)薦使用(yong)(yong)(yong)該產(chan)品，應當明(ming)(ming)(ming)確說(shuo)明(ming)(ming)(ming)。

3.申報(bao)產(chan)品(pin)上市歷史

如適用(yong)，應當提交申報產品的上市情況(kuang)、不(bu)良(liang)事件和召(zhao)回、銷(xiao)售不(bu)良(liang)事件及召(zhao)回率。

（三）非臨床資料

1.產品風(feng)險管理資(zi)料

應(ying)依據GB/T 42062提(ti)供(gong)產(chan)(chan)品(pin)風(feng)(feng)險(xian)管理報告(gao)。注冊申請(qing)人應(ying)重點說明：申報產(chan)(chan)品(pin)的(de)(de)研(yan)制階段已對(dui)(dui)有(you)關可能(neng)的(de)(de)危(wei)害及產(chan)(chan)生的(de)(de)風(feng)(feng)險(xian)進(jin)(jin)行(xing)了估計(ji)和(he)評價(jia)，針(zhen)對(dui)(dui)性地實(shi)施(shi)了降低風(feng)(feng)險(xian)的(de)(de)技術(shu)和(he)管理方面的(de)(de)措(cuo)(cuo)施(shi)。產(chan)(chan)品(pin)性能(neng)測試對(dui)(dui)上述措(cuo)(cuo)施(shi)的(de)(de)有(you)效性進(jin)(jin)行(xing)了部(bu)分(fen)驗(yan)證，達到了通用和(he)專(zhuan)用標準的(de)(de)要求。注冊申請(qing)人對(dui)(dui)所有(you)剩余(yu)風(feng)(feng)險(xian)進(jin)(jin)行(xing)了評價(jia)，全(quan)部(bu)達到可接(jie)受的(de)(de)水(shui)平(ping)。產(chan)(chan)品(pin)風(feng)(feng)險(xian)分(fen)析資(zi)料應(ying)為注冊申請(qing)人關于產(chan)(chan)品(pin)安全(quan)性的(de)(de)承諾提(ti)供(gong)支持。應(ying)對(dui)(dui)申報產(chan)(chan)品(pin)的(de)(de)可能(neng)危(wei)害進(jin)(jin)行(xing)判定并列出清單（見(jian)附件表1）。

2.醫療器(qi)械安全和性能基(ji)本原則清單

說(shuo)明申報產品符(fu)合(he)《醫療器(qi)械(xie)安全和性(xing)能基(ji)本(ben)原則(ze)清(qing)單》各項(xiang)適(shi)用(yong)要(yao)(yao)求所采用(yong)的方法，以及證明其符(fu)合(he)性(xing)的文件(jian)。對于(yu)《醫療器(qi)械(xie)安全和性(xing)能基(ji)本(ben)原則(ze)清(qing)單》中不適(shi)用(yong)的各項(xiang)要(yao)(yao)求，應當(dang)說(shuo)明理(li)由(you)。

3.產品技術(shu)要求及檢驗(yan)報告

3.1產品技術要求

產(chan)品技術要(yao)(yao)求的(de)制(zhi)定(ding)應(ying)符合(he)《醫療(liao)器械(xie)產(chan)品技術要(yao)(yao)求編寫指(zhi)導原則(ze)》的(de)相(xiang)關法規要(yao)(yao)求。本(ben)條(tiao)款給出(chu)需要(yao)(yao)考慮(lv)的(de)產(chan)品主要(yao)(yao)技術指(zhi)標，如有其他指(zhi)標，建議注(zhu)冊申請人結(jie)合(he)YY/T 1627等適用標準(zhun)(zhun)、產(chan)品設計(ji)特點及臨床應(ying)用進行(xing)制(zhi)定(ding)。注(zhu)冊申請人如不采用的(de)條(tiao)款（包括國家標準(zhun)(zhun)、行(xing)業標準(zhun)(zhun)要(yao)(yao)求），應(ying)當說(shuo)明理由(you)。

3.1.1產品型號(hao)/規格及其劃分說明(ming)

應說明(ming)申報產(chan)品(pin)的型號(hao)/規(gui)格，明(ming)確產(chan)品(pin)型號(hao)/規(gui)格的劃分說明(ming)。

3.1.2性能指標

申報產品的(de)(de)性能指(zhi)標建議包含(han)以下幾點（包括但不限于(yu)此）：外(wai)觀、裝(zhuang)量（或(huo)(huo)尺寸、質(zhi)量）、重(zhong)組(zu)膠原蛋(dan)白的(de)(de)鑒別、重(zhong)組(zu)膠原蛋(dan)白的(de)(de)含(han)量、粘度/黏(nian)度（如(ru)適用）、化學(xue)性能（如(ru)酸堿(jian)度、重(zhong)金屬等）、無(wu)菌（或(huo)(huo)微(wei)生物指(zhi)標），如(ru)有(you)配(pei)合(he)使用的(de)(de)附件（如(ru)噴瓶、滴管等）應制定相應要求等。

注冊申請(qing)人如宣稱其(qi)他技術參數和功(gong)能，應在產品技術要求(qiu)中予以規定，符合(he)《醫療器(qi)械產品技術要求(qiu)編寫指導原則》的相關法規要求(qiu)。

3.1.3檢驗方法

申報產品的檢(jian)驗(yan)方法應根據性能(neng)指標(biao)制(zhi)定(ding)，優先(xian)采用(yong)已頒布(bu)的標(biao)準或(huo)公認的檢(jian)驗(yan)方法。

考慮到產(chan)品(pin)的(de)成分、配比(bi)(bi)可能對檢(jian)(jian)驗(yan)結(jie)果產(chan)生影響(xiang)，因此產(chan)品(pin)技術要求中采(cai)用的(de)具體檢(jian)(jian)驗(yan)方法應(ying)經過驗(yan)證，以保證檢(jian)(jian)驗(yan)結(jie)果的(de)可靠性。比(bi)(bi)如重組膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白的(de)鑒別和含量的(de)檢(jian)(jian)驗(yan)方法，應(ying)結(jie)合產(chan)品(pin)實際情況(kuang)，采(cai)用適宜的(de)方法。

3.2產品檢驗報告

可提(ti)交注冊(ce)申請(qing)人(ren)出具(ju)(ju)的自檢報告或(huo)委托有資(zi)質的醫(yi)療(liao)器械(xie)檢驗(yan)機構出具(ju)(ju)的檢驗(yan)報告。若提(ti)交自檢報告，應按照(zhao)《醫(yi)療(liao)器械(xie)自檢管理規(gui)定》的要求提(ti)供相關資(zi)料。

3.3同一注冊單元(yuan)內注冊檢(jian)驗典型性產品確定原則及示例(li)

同一注(zhu)(zhu)冊(ce)(ce)單元中所檢驗(yan)產(chan)(chan)品(pin)應(ying)能夠代表(biao)(biao)注(zhu)(zhu)冊(ce)(ce)單元內其他產(chan)(chan)品(pin)安(an)全性和(he)有效(xiao)(xiao)性。代表(biao)(biao)產(chan)(chan)品(pin)的(de)確定(ding)可以(yi)通過(guo)比較(jiao)同一注(zhu)(zhu)冊(ce)(ce)單元內所有產(chan)(chan)品(pin)的(de)主(zhu)要(yao)原(yuan)材料、生(sheng)產(chan)(chan)工藝、技術結構、性能指標和(he)預(yu)期用途等資料，說明其能夠代表(biao)(biao)注(zhu)(zhu)冊(ce)(ce)單元內其他產(chan)(chan)品(pin)的(de)安(an)全性和(he)有效(xiao)(xiao)性。必要(yao)時提交(jiao)不同型號(hao)規格(ge)產(chan)(chan)品(pin)的(de)差異(yi)性檢測報告(gao)。

4.研究資料  

根據(ju)申報(bao)產(chan)品(pin)適用(yong)范圍和(he)技術特(te)征(zheng)，提(ti)供非臨床研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)綜述(shu)，逐項描述(shu)所開展(zhan)的研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)，概述(shu)研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)方(fang)(fang)法(fa)和(he)研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)結(jie)論。根據(ju)非臨床研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)綜述(shu)，提(ti)供相應的研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)資料(liao)(liao)，各項研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)可通過實(shi)驗室研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)、模型(xing)研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)、文獻研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)等方(fang)(fang)式開展(zhan)，一(yi)般應當包含研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)方(fang)(fang)案、研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)報(bao)告。采(cai)用(yong)建模研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)的，應當提(ti)供產(chan)品(pin)建模研(yan)(yan)(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)(jiu)資料(liao)(liao)。

4.1性能研究

應(ying)當提供產品化學/材(cai)料表征、物理、性(xing)能指(zhi)標(biao)及檢(jian)驗方(fang)(fang)法的確定依據(ju)、設計輸入來源以及臨床(chuang)意義，所采用的標(biao)準或(huo)方(fang)(fang)法、采用的原因及理論基(ji)礎。

申報(bao)資料(liao)中(zhong)應明確(que)各種原(yuan)材(cai)料(liao)的(de)名稱(cheng)、重(zhong)組膠原(yuan)蛋(dan)白原(yuan)材(cai)料(liao)的(de)生產(chan)工藝（如(ru)適用）、質(zhi)量控(kong)制指(zhi)標及要求等(deng)，說(shuo)明原(yuan)材(cai)料(liao)的(de)功能特點或(huo)選擇依據(ju)。

對于(yu)首次用(yong)于(yu)醫療器械方面的新材料，應提供該材料適合(he)用(yong)于(yu)符合(he)預期用(yong)途的相關研究資(zi)料。

如有配合使用的(de)附件（如噴瓶、滴管等）應制定相應要求，考慮(lv)附件與產(chan)品的(de)適(shi)宜性等。

4.2生(sheng)物學(xue)特性研究(jiu)

申報產(chan)品接觸使用者的(de)非慢(man)性創面(mian)及其周圍皮膚，屬于表面(mian)接觸器(qi)械(xie)，接觸時間(jian)結合產(chan)品的(de)使用方法確定。

申請人如進行生物(wu)學試驗(yan)(yan)，應(ying)(ying)按GB/T16886.1選擇適用(yong)的(de)試驗(yan)(yan)項目(mu)(mu)，試驗(yan)(yan)項目(mu)(mu)的(de)選擇應(ying)(ying)結合產品預期(qi)接觸的(de)部(bu)位(wei)以及產品累積使用(yong)的(de)接觸時間，根(gen)據現行版(ban)GB/T 16886.1，考慮細(xi)胞毒性、致敏反應(ying)(ying)、皮內反應(ying)(ying)項目(mu)(mu)等。

申請人(ren)如(ru)開展申報產品與市售產品的等同(tong)性比(bi)較(jiao)的生物相容性評價，應(ying)按照《醫療器(qi)械生物學評價和審查指南》，提供資料證明申報產品與已上市產品具有等同(tong)性。

4.3滅菌(jun)（除菌(jun)）工藝研究

以無菌(jun)形(xing)式提供的(de)產(chan)(chan)品，應提交產(chan)(chan)品包(bao)裝及滅菌(jun)（除菌(jun)）方(fang)法(fa)選擇的(de)依據，經過確認并進行常規控制。應考(kao)慮選用的(de)滅菌(jun)（除菌(jun)）工藝是否會對重組(zu)膠原蛋白產(chan)(chan)生影響。注冊申(shen)請人應開展以下方(fang)面的(de)研究：

4.3.1產(chan)品與滅菌(jun)（除菌(jun)）過程(cheng)的適應性：應考(kao)察滅菌(jun)（除菌(jun)）方法(fa)等(deng)工藝(yi)過程(cheng)對于(yu)產(chan)品的影(ying)響。

4.3.2包裝與(yu)滅菌（除菌）過程的適應性。

4.3.3如適用(yong)(yong)，應明(ming)確滅(mie)菌工藝（方(fang)法(fa)和參(can)數）和無菌保(bao)證(zheng)水(shui)(shui)平（SAL），無菌保(bao)證(zheng)水(shui)(shui)平（SAL）應達到(dao)10-6，提供滅(mie)菌確認報告(gao)。可(ke)根據適用(yong)(yong)情(qing)況選擇滅(mie)菌方(fang)式：

如采用濕熱滅(mie)菌，參(can)照GB 18278.1標準的要求(qiu)開展研究；

如采用(yong)輻射滅菌，參(can)照(zhao)GB 18280.1、GB 18280.2、GB/T 18280.3等(deng)標準(zhun)的要求(qiu)開展(zhan)研究(jiu)。

4.3.4若申報產品不能耐受終端滅菌工藝，需提供依據及不能耐受的驗證資料。

如適用(yong)(yong)，應明(ming)確(que)采用(yong)(yong)的除(chu)(chu)菌(jun)(jun)工(gong)藝(yi)，如過濾除(chu)(chu)菌(jun)(jun)等。應明(ming)確(que)除(chu)(chu)菌(jun)(jun)工(gong)藝(yi)（方法和參數）和保證水平(ping)，提供確(que)認(ren)報(bao)告。

4.4穩定性研究

4.4.1貨架有效期

應(ying)提供貨架有效期(qi)研究(jiu)資料，證(zheng)明在貨架有效期(qi)內(nei)，產品可以保(bao)持性(xing)(xing)能(neng)功能(neng)滿足使用(yong)要求(qiu)。注(zhu)冊申請人需(xu)在試(shi)驗(yan)方案中設定檢測(ce)項目、檢測(ce)方法及判定標(biao)準(zhun)。檢測(ce)項目包括產品自身性(xing)(xing)能(neng)檢測(ce)和包裝系統性(xing)(xing)能(neng)檢測(ce)兩方面。實(shi)時穩(wen)定性(xing)(xing)試(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)是驗(yan)證(zheng)產品貨架有效期(qi)的直接(jie)證(zheng)據。當(dang)加速穩(wen)定性(xing)(xing)試(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)與其(qi)不一致(zhi)時，應(ying)以實(shi)時穩(wen)定性(xing)(xing)試(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)為準(zhun)。

對(dui)于非無菌形式(shi)提(ti)供(gong)的(de)(de)產(chan)品，開(kai)封后(hou)(hou)可(ke)以多次使(shi)用時(shi)，應(ying)對(dui)其開(kai)封后(hou)(hou)穩定性(xing)進行研究。為確認產(chan)品開(kai)封后(hou)(hou)，在(zai)實際使(shi)用環境下(xia)，經過一段時(shi)期仍然能夠(gou)滿(man)足使(shi)用要求(qiu)的(de)(de)最長存(cun)放時(shi)間，建議通(tong)過分析評價后(hou)(hou)選擇合適的(de)(de)檢測項目(mu)（如微生物指標等），提(ti)供(gong)研究報告。

產(chan)品以無菌(jun)和(he)非無菌(jun)兩種(zhong)形式提供時(shi)，應(ying)分別進(jin)行有效期(qi)的(de)研究。

4.4.2包裝研究

應提(ti)供包裝研究資料(liao)，證明在生產(chan)企(qi)業規定的運輸貯存(cun)條(tiao)件下，運輸和貯存(cun)過(guo)程中的環(huan)境條(tiao)件（例如：震(zhen)動、振動、溫度(du)、濕度(du)、光(guang)線的波動）不(bu)會對產(chan)品的性能造成不(bu)利影響。

注冊申請(qing)人應(ying)(ying)提交最終成品包(bao)裝(zhuang)的初始完整性(xing)(xing)和維持完整性(xing)(xing)的驗(yan)(yan)證(zheng)資料。對于在加(jia)速穩(wen)定(ding)性(xing)(xing)試(shi)驗(yan)(yan)中可能導致產品變(bian)性(xing)(xing)而不(bu)適于選擇加(jia)速穩(wen)定(ding)性(xing)(xing)試(shi)驗(yan)(yan)研究其包(bao)裝(zhuang)的情況，應(ying)(ying)以(yi)實時穩(wen)定(ding)性(xing)(xing)試(shi)驗(yan)(yan)進行(xing)驗(yan)(yan)證(zheng)。

包(bao)(bao)裝研究資料應(ying)包(bao)(bao)括封(feng)口試驗以及包(bao)(bao)裝材料對滅菌的適應(ying)性研究。可依據GB/T 19633系列標準對包(bao)(bao)裝進行分析研究和(he)評價。

4.5證明產品安全性(xing)、有效性(xing)的其他研究資料

應提供申(shen)報產品不可(ke)被人體(ti)吸收(shou)的(de)相(xiang)關研(yan)究資(zi)料。如選(xuan)擇或(huo)設計(ji)可(ke)以模擬臨(lin)床使(shi)用方式(shi)的(de)試驗。

應(ying)提供(gong)申報產品中重組膠(jiao)原(yuan)蛋白(bai)成分的質量控制相(xiang)關(guan)(guan)資料。建議參照(zhao)YY/T 1849標(biao)準(zhun)及其他(ta)相(xiang)關(guan)(guan)標(biao)準(zhun)的要求（如今后(hou)有適用的其他(ta)標(biao)準(zhun)發布，應(ying)參照(zhao)執行(xing)），提供(gong)原(yuan)材料相(xiang)關(guan)(guan)質控資料。

申報(bao)產品如宣稱(cheng)形成(cheng)物理阻隔的保護層或具(ju)有成(cheng)膜(mo)效果，應提(ti)供適用(yong)于申報(bao)產品的成(cheng)膜(mo)性研究測試資(zi)料。

4.6其他資料

對于符合《免于臨(lin)床評(ping)價醫療器械目(mu)錄(lu)》的產品(pin), 注(zhu)冊申請人可根據(ju)產品(pin)型式選(xuan)擇對應的目(mu)錄(lu)產品(pin)免于進行臨(lin)床評(ping)價。

如無菌形式提供(gong)的(de)重(zhong)組膠原(yuan)蛋白(bai)凝膠、液(ye)體、敷(fu)貼、膏狀型產品(pin)(pin)等，符合《免于臨床評(ping)價(jia)醫療器械(xie)目錄(lu)》中相應產品(pin)(pin)的(de)描述時，申(shen)報產品(pin)(pin)可按照(zhao)《列(lie)入免于臨床評(ping)價(jia)醫療器械(xie)目錄(lu)產品(pin)(pin)對比說明技(ji)術指導原(yuan)則》提供(gong)相應資料，從(cong)基本原(yuan)理(li)、結構組成、性(xing)能、安全性(xing)、適用范圍等方面(mian)，證明產品(pin)(pin)的(de)安全有效性(xing)。

（四）臨床評價資料

對于不符(fu)合《免于臨(lin)床(chuang)(chuang)評價醫(yi)(yi)療(liao)器(qi)械目錄》的產品，應按照《醫(yi)(yi)療(liao)器(qi)械注冊與備(bei)案管(guan)理(li)辦(ban)法(fa)》《醫(yi)(yi)療(liao)器(qi)械臨(lin)床(chuang)(chuang)評價技術指導(dao)原則》《醫(yi)(yi)療(liao)器(qi)械臨(lin)床(chuang)(chuang)試驗(yan)質量管(guan)理(li)規范(fan)》等要求提交臨(lin)床(chuang)(chuang)評價資料(liao)。

1.同品(pin)種臨床評價路徑

在滿足注冊法(fa)規要求(qiu)的(de)前(qian)提下，可按照(zhao)《醫療器械臨(lin)床(chuang)評(ping)(ping)價等同(tong)性論證技術指(zhi)導原則(ze)》進行境(jing)內已上市同(tong)品種產品的(de)對比、分(fen)析、評(ping)(ping)價，并按照(zhao)《醫療器械注冊申報(bao)臨(lin)床(chuang)評(ping)(ping)價報(bao)告技術指(zhi)導原則(ze)》要求(qiu)的(de)項(xiang)目(mu)和(he)格(ge)式出(chu)具評(ping)(ping)價報(bao)告。

2.臨床試驗路徑

臨(lin)床(chuang)(chuang)試驗(yan)(yan)需(xu)按(an)照《醫療(liao)器械(xie)臨(lin)床(chuang)(chuang)試驗(yan)(yan)質量管理規范(fan)》開(kai)(kai)展，提交完整的(de)臨(lin)床(chuang)(chuang)試驗(yan)(yan)資料。臨(lin)床(chuang)(chuang)試驗(yan)(yan)的(de)設(she)計(ji)可參(can)考《醫療(liao)器械(xie)臨(lin)床(chuang)(chuang)試驗(yan)(yan)設(she)計(ji)指導原(yuan)則》，根據注冊申請人宣(xuan)稱的(de)申報產品適用范(fan)圍開(kai)(kai)展。

（五）產品說(shuo)明(ming)書(shu)和(he)標簽(qian)樣稿

產(chan)(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)和標簽的(de)(de)編寫(xie)應(ying)(ying)符(fu)合《醫療器械(xie)說(shuo)明書(shu)和標簽管(guan)理規定》、YY/T 0466.1、YY/T 1627和相關法規、規章、規范(fan)性文件、強制(zhi)性標準的(de)(de)要求。說(shuo)明書(shu)中關于產(chan)(chan)品(pin)性能(neng)特征的(de)(de)描(miao)述(shu)不(bu)應(ying)(ying)超過注(zhu)(zhu)冊申請(qing)人提交的(de)(de)研究資料及(ji)產(chan)(chan)品(pin)技術要求，不(bu)得(de)含有未經驗證的(de)(de)夸大宣(xuan)傳的(de)(de)相關描(miao)述(shu)。申報產(chan)(chan)品(pin)的(de)(de)說(shuo)明書(shu)和標簽原則上不(bu)體現重組膠原蛋(dan)白原材料的(de)(de)結構特征、氨基酸序列等相關信息（除非有充分(fen)資料證明重組膠原蛋(dan)白原材料的(de)(de)結構特征等能(neng)夠(gou)給申報產(chan)(chan)品(pin)功能(neng)帶來額外獲益）。應(ying)(ying)注(zhu)(zhu)意(yi)以(yi)下(xia)內容：

1.產品(pin)的(de)結構組成及性能(neng)指標(biao)應與(yu)產品(pin)技術要求內容一致。

2.無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)形(xing)(xing)式提(ti)供(gong)的(de)(de)產(chan)品(pin)應當(dang)注(zhu)明滅菌(jun)(jun)(jun)(jun)方式或(huo)除菌(jun)(jun)(jun)(jun)工藝、“無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)”等字(zi)(zi)樣或(huo)符號；非無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)形(xing)(xing)式提(ti)供(gong)的(de)(de)產(chan)品(pin)應當(dang)注(zhu)明微生物(wu)指標、“不適(shi)用于無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)操(cao)作的(de)(de)非慢(man)性創面護理 ”、“非無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)”字(zi)(zi)樣或(huo)符號，防止臨(lin)床誤操(cao)作。

3.注(zhu)明產品主(zhu)要原材料(liao)，應有對材料(liao)過敏者(zhe)禁(jin)止使(shi)用的提示。

4.使(shi)用前(qian)檢查包裝是(shi)否完(wan)好，如有破損，禁止使(shi)用。

5.應(ying)標(biao)明產(chan)品(pin)的貨架有效期(qi)，嚴(yan)禁使(shi)用(yong)超過貨架有效期(qi)的產(chan)品(pin)。

6.產品應(ying)注(zhu)明建議使(shi)用時間和使(shi)用方法。如產品可(ke)多次(ci)使(shi)用，應(ying)當明確提示(shi)使(shi)用者該產品開封(feng)后應(ying)如何保(bao)存以及限(xian)定時間內使(shi)用完畢。

7.使(shi)用(yong)中若有紅腫、疼(teng)痛(tong)或瘙癢等不(bu)適癥狀，請立即(ji)停止使(shi)用(yong)并清(qing)洗干凈，必要時向醫生咨詢(xun)或及時就醫。

8.明確針(zhen)對(dui)產品(pin)特點的(de)特殊注意事項、警示信息、可能(neng)的(de)不(bu)良(liang)事件及處理(li)措施等(deng)。如創面(mian)感染(ran)的(de)患者不(bu)宜使(shi)用等(deng)。

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[34]中華人(ren)民共(gong)和國藥典(dian)（2020版）[S].

附表

產品主要危險（源）

本指(zhi)導(dao)原(yuan)則(ze)旨在指(zhi)導(dao)注(zhu)冊(ce)申(shen)請(qing)人(ren)對醫療(liao)器械所(suo)用(yong)重(zhong)(zhong)組人(ren)源化膠原(yuan)蛋白(bai)原(yuan)材(cai)料進行充分的(de)(de)研究(jiu)，并整(zheng)理形成產品注(zhu)冊(ce)申(shen)報資(zi)料，同時也(ye)為(wei)技術審評部門對重(zhong)(zhong)組人(ren)源化膠原(yuan)蛋白(bai)制(zhi)成的(de)(de)產品注(zhu)冊(ce)申(shen)報資(zi)料包括所(suo)引用(yong)主文檔相關內容(rong)的(de)(de)技術審評提供參考。

本指(zhi)導原(yuan)(yuan)(yuan)則系對(dui)醫(yi)療(liao)器(qi)械(xie)用(yong)重組(zu)人(ren)源(yuan)化(hua)膠(jiao)(jiao)原(yuan)(yuan)(yuan)蛋白原(yuan)(yuan)(yuan)材料(liao)的(de)(de)(de)一(yi)般要求，適(shi)用(yong)于人(ren)膠(jiao)(jiao)原(yuan)(yuan)(yuan)蛋白的(de)(de)(de)所有型別，注冊申請人(ren)需依(yi)據具(ju)體醫(yi)療(liao)器(qi)械(xie)產(chan)品(pin)的(de)(de)(de)特(te)性(xing)(xing)(xing)對(dui)產(chan)品(pin)注冊申報資料(liao)涉(she)及的(de)(de)(de)原(yuan)(yuan)(yuan)材料(liao)相關內容進行充實和細化(hua)，并依(yi)據產(chan)品(pin)的(de)(de)(de)具(ju)體特(te)性(xing)(xing)(xing)確定本指(zhi)導原(yuan)(yuan)(yuan)則相關內容的(de)(de)(de)適(shi)用(yong)性(xing)(xing)(xing)。本指(zhi)導原(yuan)(yuan)(yuan)則不直接涉(she)及重組(zu)人(ren)源(yuan)化(hua)膠(jiao)(jiao)原(yuan)(yuan)(yuan)蛋白原(yuan)(yuan)(yuan)材料(liao)制成的(de)(de)(de)醫(yi)療(liao)器(qi)械(xie)終產(chan)品(pin)的(de)(de)(de)安全性(xing)(xing)(xing)或有效性(xing)(xing)(xing)評價(jia)，具(ju)體產(chan)品(pin)的(de)(de)(de)評價(jia)請參考(kao)相應的(de)(de)(de)產(chan)品(pin)注冊審查指(zhi)導原(yuan)(yuan)(yuan)則。

本(ben)指(zhi)導(dao)原(yuan)則是(shi)對注冊(ce)申(shen)請人(ren)和(he)技術審評人(ren)員(yuan)的(de)指(zhi)導(dao)性文件(jian)，但不包括注冊(ce)審批(pi)所涉及的(de)行政事項，亦不作為法(fa)規(gui)(gui)強制(zhi)執行，如果有能夠滿足相關法(fa)規(gui)(gui)要求(qiu)的(de)其他方法(fa)，也可以采用(yong)，但是(shi)需要提供詳細(xi)的(de)研究資料(liao)和(he)驗證資料(liao)；需在遵循(xun)相關法(fa)規(gui)(gui)和(he)強制(zhi)性標(biao)準的(de)前提下(xia)使用(yong)本(ben)指(zhi)導(dao)原(yuan)則。

本指導原則(ze)是在現(xian)行(xing)法(fa)規(gui)和(he)標(biao)準體系以(yi)及當前認知水平下制(zhi)定的，隨著法(fa)規(gui)和(he)標(biao)準的不(bu)斷完善，以(yi)及科(ke)學(xue)技術的不(bu)斷發展，本指導原則(ze)相關內容也將進行(xing)適(shi)時的調整(zheng)。

一、前言

近年來(lai)，隨著基(ji)因重(zhong)(zhong)組、蛋(dan)白質組學等(deng)基(ji)礎理(li)論、技術手(shou)段和(he)臨床醫療探(tan)索(suo)研(yan)究的(de)(de)(de)不斷發展(zhan)，重(zhong)(zhong)組膠原蛋(dan)白日益成為重(zhong)(zhong)要的(de)(de)(de)生物材料，為相(xiang)關醫療器械的(de)(de)(de)研(yan)發提供(gong)了新的(de)(de)(de)思路與(yu)方法。重(zhong)(zhong)組人(ren)源化膠原蛋(dan)白是由(you)DNA重(zhong)(zhong)組技術制(zhi)備的(de)(de)(de)人(ren)膠原蛋(dan)白特定型別基(ji)因編碼的(de)(de)(de)全(quan)長或(huo)部分(fen)氨基(ji)酸(suan)序列片(pian)段，或(huo)是含人(ren)膠原蛋(dan)白功能片(pian)段的(de)(de)(de)組合。

重組人(ren)源化膠(jiao)原(yuan)(yuan)蛋白(bai)僅是重組膠(jiao)原(yuan)(yuan)蛋白(bai)的一類，材料(liao)特性并不能完全(quan)(quan)決定最(zui)終(zhong)產品的安全(quan)(quan)性和有效性。本指(zhi)導原(yuan)(yuan)則(ze)中(zhong)的“原(yuan)(yuan)材料(liao)”是指(zhi)用于生產制造醫療器械用的重組人(ren)源化膠(jiao)原(yuan)(yuan)蛋白(bai)材料(liao)。除(chu)特別說(shuo)明(ming)外(wai)，本指(zhi)導原(yuan)(yuan)則(ze)中(zhong)的“材料(liao)”等同于“原(yuan)(yuan)材料(liao)”。

重(zhong)(zhong)組(zu)人源(yuan)化(hua)膠原(yuan)蛋白是通過基因(yin)工(gong)程生(sheng)產(chan)的(de)(de)蛋白，工(gong)程細(xi)胞構(gou)建過程、生(sheng)產(chan)用細(xi)胞的(de)(de)質(zhi)量控制(zhi)及常規生(sheng)產(chan)過程控制(zhi)是該(gai)(gai)原(yuan)材(cai)料(liao)生(sheng)產(chan)工(gong)藝及風險(xian)評價的(de)(de)基礎，此方面主(zhu)要的(de)(de)驗證資(zi)料(liao)，可參考本(ben)指(zhi)導原(yuan)則(ze)(ze)的(de)(de)資(zi)料(liao)性(xing)(xing)附件(jian)作為(wei)原(yuan)材(cai)料(liao)研究資(zi)料(liao)的(de)(de)補充，但不作為(wei)產(chan)品(pin)(pin)注冊申報資(zi)料(liao)的(de)(de)必要內(nei)容(rong)。結合重(zhong)(zhong)組(zu)人源(yuan)化(hua)膠原(yuan)蛋白的(de)(de)特點(dian)，該(gai)(gai)資(zi)料(liao)性(xing)(xing)附件(jian)修改引用了國家(jia)藥(yao)監局藥(yao)審(shen)中心(xin)《重(zhong)(zhong)組(zu)制(zhi)品(pin)(pin)生(sheng)產(chan)用哺乳(ru)動物細(xi)胞質(zhi)量控制(zhi)技(ji)術評價一般(ban)原(yuan)則(ze)(ze)》《體外基因(yin)修飾系統(tong)藥(yao)學研究與(yu)評價技(ji)術指(zhi)導原(yuan)則(ze)(ze)》等(deng)生(sheng)物制(zhi)品(pin)(pin)指(zhi)導原(yuan)則(ze)(ze)的(de)(de)相關內(nei)容(rong)。

二、評價要點

（一） 重(zhong)組(zu)人源化(hua)膠原蛋白(bai)原材(cai)料性能研究

為了確保(bao)重(zhong)組人源化(hua)(hua)膠原(yuan)蛋白原(yuan)材料質量可控，重(zhong)組人源化(hua)(hua)膠原(yuan)蛋白需(xu)參考相關行業標準(zhun)進行必要的(de)鑒別、純度和(he)雜質等(deng)分(fen)析，可采用不(bu)同的(de)分(fen)析方法對原(yuan)材料的(de)分(fen)子量、等(deng)電點、氨(an)基酸序列、各(ge)種翻譯后修(xiu)飾（如脫酰胺化(hua)(hua)、氧化(hua)(hua)、糖譜(pu)/糖基化(hua)(hua)修(xiu)飾、脯氨(an)酸羥基化(hua)(hua)等(deng)）進行充分(fen)鑒定，并進行相應的(de)檢測，以(yi)確認終產物(wu)具有擬宣稱的(de)原(yuan)材料構(gou)象、聚集(ji)狀態(tai)、降(jiang)解狀態(tai)及膠原(yuan)蛋白高級結構(gou)。

材(cai)料理(li)化(hua)特性(xing)分析需(xu)按照醫療器(qi)械(xie)制(zhi)(zhi)備工藝和(he)特點(dian)，結合其(qi)風險控制(zhi)(zhi)要求(qiu)進行相關(guan)研(yan)究，建議對(dui)如(ru)下常規理(li)化(hua)項(xiang)目(mu)進行研(yan)究，例(li)如(ru)氨基酸序列(lie)、蛋(dan)(dan)白(bai)空間(jian)結構、劑型（如(ru)溶(rong)液、凍(dong)干(gan)粉、凝膠、纖維(wei)、海綿等(deng)）、膠原蛋(dan)(dan)白(bai)型別等(deng)特異(yi)性(xing)性(xing)能，同時結合醫療器(qi)械(xie)特點(dian)，完善(shan)理(li)化(hua)性(xing)能指標要求(qiu)。

需根據不同的預期用(yong)(yong)途及使用(yong)(yong)部(bu)位、不同生產工藝、預期使用(yong)(yong)效果和最終醫療器械(xie)的狀態，選擇適用(yong)(yong)的指標(biao)；根據膠原(yuan)蛋白原(yuan)材料是否經(jing)過交聯或化學修(xiu)飾，宜提(ti)供交聯劑或修(xiu)飾劑的殘留量、降解性(xing)能等的研究，提(ti)供相應(ying)的研究報告。

性(xing)能指標的(de)建立及驗證(zheng)取決于膠原(yuan)蛋白(bai)原(yuan)材料(liao)性(xing)質和(he)用(yong)途、生(sheng)產和(he)純化(hua)工(gong)藝(yi)及生(sheng)產工(gong)藝(yi)的(de)經(jing)驗等(deng)多種因素。新(xin)的(de)分析技術(shu)(shu)及對現(xian)有技術(shu)(shu)的(de)改進(jin)正在不斷(duan)進(jin)行，適當時需使(shi)用(yong)這些(xie)新(xin)的(de)技術(shu)(shu)。因現(xian)有技術(shu)(shu)原(yuan)因而產生(sheng)偏差的(de)需進(jin)行合理性(xing)解釋說明(ming)。

1.鑒別

1.1氨基(ji)酸序列(lie)及(ji)覆蓋(gai)度

首先(xian)需(xu)明確氨(an)(an)基(ji)酸(suan)序(xu)(xu)列的(de)(de)(de)選擇(ze)(ze)依據，如為特定(ding)(ding)氨(an)(an)基(ji)酸(suan)序(xu)(xu)列片(pian)(pian)段(duan)組(zu)成的(de)(de)(de)，還需(xu)明確片(pian)(pian)段(duan)重(zhong)復次數(shu)及依據。需(xu)采用綜(zong)合的(de)(de)(de)方(fang)法測定(ding)(ding)目標膠(jiao)原蛋白原材料的(de)(de)(de)氨(an)(an)基(ji)酸(suan)序(xu)(xu)列，并與其基(ji)因序(xu)(xu)列對(dui)應的(de)(de)(de)理(li)論(lun)(lun)氨(an)(an)基(ji)酸(suan)序(xu)(xu)列進(jin)行比較驗證。肽段(duan)覆(fu)蓋率(lv)的(de)(de)(de)檢測結果需(xu)為100%覆(fu)蓋，末端氨(an)(an)基(ji)酸(suan)序(xu)(xu)列檢測結果需(xu)與理(li)論(lun)(lun)序(xu)(xu)列完全一致。可按照《重(zhong)組(zu)人源化(hua)膠(jiao)原蛋白》行業標準(zhun)的(de)(de)(de)要求，直(zhi)接使(shi)用供試品檢測，并選擇(ze)(ze)適宜(yi)的(de)(de)(de)酶解(jie)條件(jian)進(jin)行水解(jie)，酶解(jie)后選擇(ze)(ze)不小于5個連續氨(an)(an)基(ji)酸(suan)的(de)(de)(de)片(pian)(pian)段(duan)為基(ji)本的(de)(de)(de)序(xu)(xu)列單(dan)元(yuan)進(jin)行覆(fu)蓋分析。

如(ru)適用，目標膠原蛋白材料的理論氨基(ji)(ji)酸序列需(xu)包括二硫鍵連接方式。氨基(ji)(ji)酸序列測定還(huan)需(xu)考慮可能(neng)存在的N端甲硫氨酸（如(ru)大腸桿(gan)菌來源的膠原蛋白原材料），信(xin)號肽(tai)或(huo)前導序列。

1.1.1氨(an)基酸(suan)組成 

使用各種(zhong)水(shui)解法和分(fen)析手段測定(ding)氨基(ji)酸(suan)(suan)的組(zu)成(cheng)，并與目的蛋白基(ji)因序(xu)列(lie)推(tui)導(dao)的氨基(ji)酸(suan)(suan)組(zu)成(cheng)或天然異構(gou)體比較。如需(xu)要時需(xu)考慮(lv)分(fen)子量的大小。多數(shu)情況(kuang)(kuang)下，氨基(ji)酸(suan)(suan)組(zu)成(cheng)分(fen)析對肽段和小蛋白可(ke)提供(gong)有價值的結構(gou)資料，但對大蛋白一般意義(yi)較小。在(zai)多數(shu)情況(kuang)(kuang)下，氨基(ji)酸(suan)(suan)定(ding)量分(fen)析數(shu)據可(ke)用于確定(ding)蛋白含量。

1.1.2氨基酸末端序列 

氨(an)(an)基(ji)(ji)(ji)酸末端(duan)(duan)分析用于鑒(jian)別(bie)N-端(duan)(duan)和C-端(duan)(duan)氨(an)(an)基(ji)(ji)(ji)酸的(de)性質(zhi)(zhi)和同質(zhi)(zhi)性。用氨(an)(an)基(ji)(ji)(ji)酸序(xu)列分析儀(yi)或質(zhi)(zhi)譜法測定N端(duan)(duan)和/或C端(duan)(duan)氨(an)(an)基(ji)(ji)(ji)酸序(xu)列，其結果需符合理論預(yu)測。

若發現目(mu)的(de)膠原蛋(dan)白材料的(de)末(mo)端(duan)氨(an)基酸發生改變(bian)(bian)時(shi)，需(xu)使用適當的(de)分析(xi)手段判定變(bian)(bian)異體的(de)相應變(bian)(bian)異數量。需(xu)將這(zhe)些氨(an)基酸末(mo)端(duan)序(xu)列與(yu)來(lai)自目(mu)的(de)膠原蛋(dan)白基因序(xu)列推(tui)導(dao)的(de)氨(an)基酸末(mo)端(duan)序(xu)列進行比較。

1.2肽圖

按照《中華人民共和國(guo)藥典》 四部 ;通(tong)則 肽圖(tu)檢查法(fa) 第(di)一法(fa) 胰蛋(dan)白(bai)酶裂解-反相(xiang)高效(xiao)液相(xiang)色譜法(fa)進行測(ce)定，建立膠原蛋(dan)白(bai)原材料標準肽圖(tu)。

推薦利用四極桿飛行時間串聯質(zhi)譜(pu)(pu)儀（Q-TOF MS）建立標(biao)準肽圖(tu)，作為(wei)膠(jiao)原蛋白(bai)材料的指紋(wen)圖(tu)譜(pu)(pu)，用于材料的批(pi)間一致(zhi)性(xing)和穩定性(xing)評價，以(yi)及材料特(te)異性(xing)的鑒別。

需用合適(shi)的(de)(de)酶或(huo)化學(xue)試劑使所選的(de)(de)材(cai)料(liao)片(pian)段產生不(bu)連續多肽，應用高效液相色譜(pu)法(fa)(fa)（HPLC）或(huo)其(qi)他(ta)適(shi)當(dang)的(de)(de)方法(fa)(fa)分(fen)析(xi)該多肽片(pian)段。盡(jin)量(liang)應用氨基(ji)酸(suan)組成分(fen)析(xi)技術，N-末端測序或(huo)質譜(pu)法(fa)(fa)鑒別(bie)多肽片(pian)段。至少對材(cai)料(liao)成品(pin)放(fang)行來說,經驗(yan)證的(de)(de)肽譜(pu)分(fen)析(xi)經常(chang)是(shi)確證目的(de)(de)材(cai)料(liao)結構/鑒別(bie)的(de)(de)適(shi)當(dang)方法(fa)(fa)。具體分(fen)析(xi)方法(fa)(fa)可(ke)參考《重組膠(jiao)原蛋白肽圖指紋圖譜(pu)分(fen)析(xi)》行業標準。

1.3分子量

對申報(bao)醫療器械所用膠原蛋白材料(liao)可參照《中(zhong)華人民共和國藥典》高(gao)效液相色譜(pu)法(fa)、“電(dian)泳(yong)法(fa)”的“第五法(fa)  SDS-聚(ju)丙烯酰胺(an)凝(ning)膠電(dian)泳(yong)法(fa)”、基質輔助(zhu)激光解析(xi)電(dian)離(li)飛行時間(jian)質譜(pu)方(fang)法(fa)建立分子(zi)(zi)量及分布檢測(ce)方(fang)法(fa)，也(ye)可以運用其他適當技術測(ce)定分子(zi)(zi)量，如分子(zi)(zi)排阻(zu)色譜(pu)法(fa)等。需通過至少一(yi)種合理(li)的、經驗證的方(fang)法(fa)證明(ming)其實際(ji)分子(zi)(zi)量與理(li)論預測(ce)一(yi)致。

高(gao)效(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)法(fa)目標蛋白的(de)出峰保留時(shi)間需與(yu)參比(bi)(bi)品一致(zhi)；高(gao)分辨質譜(pu)法(fa)分子(zi)量(liang)需與(yu)參比(bi)(bi)品一致(zhi)；SDS-聚丙烯(xi)酰胺凝膠電泳法(fa)分子(zi)量(liang)電泳條帶位(wei)置需與(yu)參比(bi)(bi)品一致(zhi)。同時(shi)，需就(jiu)參比(bi)(bi)品的(de)選(xuan)擇提供(gong)合理性依(yi)據。

1.4等電點

按照《中華人民共和國(guo)藥(yao)典(dian)》 四部通(tong)則 電泳(yong)法(fa)第六(liu)法(fa)（等電聚焦電泳(yong)法(fa)）或0542毛細管電泳(yong)法(fa)進行檢測(ce)，等電點(dian)需(xu)在標(biao)示(shi)范圍(wei)內，也可以運用其他適當的(de)方法(fa)測(ce)定。

1.5巰基和二硫鍵

如果(guo)目的膠(jiao)原(yuan)蛋白材料的基(ji)因(yin)序列(lie)存在半(ban)胱氨酸殘基(ji)時，需盡可能確定巰基(ji)和(he)/或二硫鍵的數(shu)量和(he)位置(zhi)。使用方法包括肽譜分析（還(huan)原(yuan)和(he)非(fei)還(huan)原(yuan)條件下）、質譜測(ce)定法或其(qi)他適當的方法。

1.6消光(guang)系數（或克(ke)分子吸(xi)光(guang)度(du)）

多數(shu)情(qing)況(kuang)下，可取目的(de)膠原蛋白材料于UV/可見光(guang)波長處測定消光(guang)系數(shu)（或克(ke)分(fen)子吸光(guang)度(du)）。消光(guang)系數(shu)的(de)測定為(wei)使用UV/可見光(guang)或分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計檢測已知蛋白含量(liang)的(de)溶(rong)液，蛋白含量(liang)應用氨基酸組(zu)成分(fen)析技術或定氮法等方法測定。

1.7電泳圖型

應(ying)用(yong)PAGE電(dian)泳(yong)、等電(dian)聚焦、SDS－PAGE電(dian)泳(yong)、免(mian)疫印(yin)跡、毛細管電(dian)泳(yong)法或其他適當的方(fang)法,獲得目的膠(jiao)原蛋白材(cai)料的一致性(xing)，同一性(xing)和(he)純度的電(dian)泳(yong)圖(tu)譜和(he)數據。

1.8液相色譜圖譜

應用分(fen)子篩色譜(pu)(pu)、反相液(ye)相色譜(pu)(pu)、離子交(jiao)換液(ye)相色譜(pu)(pu)、親和(he)色譜(pu)(pu)或其(qi)他(ta)適當方(fang)法，獲得目的(de)膠原蛋白材(cai)料(liao)的(de)一致性、同(tong)一性和(he)純度的(de)色譜(pu)(pu)圖譜(pu)(pu)和(he)數據(ju)。

2.結構表征

2.1脯氨酸羥基化

若(ruo)在設計(ji)時進行脯(fu)氨酸羥(qian)基(ji)化(hua)，需按YY/T 1849《重組膠原蛋白》中的要求(qiu)進行分析，并(bing)規定(ding)標示值(zhi)。

2.2高級結構分析

鑒于(yu)高級結(jie)構與重組(zu)人(ren)源(yuan)化膠原蛋白(bai)表(biao)現出(chu)的(de)性(xing)能和功能密切相(xiang)關，若材(cai)料(liao)擬宣(xuan)稱(cheng)具有相(xiang)應的(de)高級結(jie)構，采(cai)用多種方(fang)(fang)法(fa)對(dui)高級結(jie)構進行研究分析，包括以下列舉的(de)方(fang)(fang)法(fa)及其他(ta)結(jie)構表(biao)征方(fang)(fang)法(fa)，如冷凍電鏡(jing)、蛋白(bai)質(zhi)晶體結(jie)構等方(fang)(fang)法(fa)。

2.2.1三螺旋(xuan)結構分析(xi)

可(ke)(ke)采(cai)用圓二色譜(pu)(pu)在特(te)定(ding)常(chang)規(gui)試驗條件(jian)下的(de)(de)檢(jian)測重組(zu)人源化膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)的(de)(de)CD光(guang)(guang)(guang)譜(pu)(pu)特(te)征(zheng)。若采(cai)用特(te)定(ding)的(de)(de)非(fei)常(chang)規(gui)條件(jian)檢(jian)測，則檢(jian)測結(jie)(jie)果僅反映(ying)膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)材料(liao)(liao)在該(gai)條件(jian)下可(ke)(ke)（否）具有(you)形成類(lei)似膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)三螺旋結(jie)(jie)構(gou)(gou)的(de)(de)CD光(guang)(guang)(guang)譜(pu)(pu)特(te)征(zheng)能力；此時需(xu)分析(xi)(xi)并闡述(shu)所檢(jian)測樣品(pin)(pin)是否代表“原(yuan)材料(liao)(liao)樣品(pin)(pin)”，還是“原(yuan)材料(liao)(liao)樣品(pin)(pin)”的(de)(de)特(te)定(ding)處理（后續(xu)加工）樣品(pin)(pin)。同(tong)時建議進行(xing)(xing)最(zui)低檢(jian)出限(xian)分析(xi)(xi)，其結(jie)(jie)果需(xu)與生理性膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)相(xiang)近（相(xiang)差(cha)不(bu)超過(guo)一個數量級）。可(ke)(ke)采(cai)用X射(she)線晶體學(xue)技術(shu)或冷(leng)凍電鏡技術(shu)在原(yuan)子結(jie)(jie)構(gou)(gou)水(shui)平考證膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)材料(liao)(liao)或其包含的(de)(de)特(te)定(ding)氨基酸序列的(de)(de)三螺旋結(jie)(jie)構(gou)(gou)特(te)性，計(ji)算有(you)結(jie)(jie)構(gou)(gou)信息的(de)(de)序列占整個蛋(dan)(dan)白(bai)序列的(de)(de)百分比；可(ke)(ke)采(cai)用差(cha)示掃描量熱法(fa)檢(jian)測膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)材料(liao)(liao)結(jie)(jie)構(gou)(gou)變化的(de)(de)熱效應(ying)輔助說明膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)的(de)(de)高級結(jie)(jie)構(gou)(gou)特(te)征(zheng)；可(ke)(ke)采(cai)用紅外(wai)(wai)光(guang)(guang)(guang)譜(pu)(pu)進行(xing)(xing)結(jie)(jie)構(gou)(gou)分析(xi)(xi)，其非(fei)特(te)征(zheng)區(qu)（如(ru)：酰胺(an)a、b）和(he)特(te)征(zheng)區(qu)（如(ru)：酰胺(an)I、酰胺(an)II、酰胺(an)III）的(de)(de)特(te)征(zheng)峰(feng)位置(zhi)需(xu)與參(can)比品(pin)(pin)一致；可(ke)(ke)采(cai)用拉曼光(guang)(guang)(guang)譜(pu)(pu)，其拉曼光(guang)(guang)(guang)譜(pu)(pu)圖(tu)需(xu)與參(can)比品(pin)(pin)一致；也可(ke)(ke)應(ying)用其它紫外(wai)(wai)或可(ke)(ke)見(jian)光(guang)(guang)(guang)吸收光(guang)(guang)(guang)譜(pu)(pu)法(fa)、核磁共振（NMR）等適當(dang)的(de)(de)方法(fa)檢(jian)測。

2.2.2纖維(wei)質量/多孔網(wang)狀結構(gou)表征

若材(cai)料預期形(xing)(xing)成(cheng)纖維/網(wang)狀結(jie)構(gou)時，宜使用掃描電(dian)(dian)子(zi)顯微鏡（SEM）、透射電(dian)(dian)子(zi)顯微鏡（TEM）或原(yuan)子(zi)力(li)顯微鏡（AFM）等(deng)方法觀察(cha)膠原(yuan)蛋白材(cai)料形(xing)(xing)成(cheng)膠原(yuan)纖維束/多(duo)孔(kong)網(wang)狀結(jie)構(gou)等(deng)，需(xu)明確兩種方法具體(ti)的(de)制樣和(he)觀察(cha)測定過程(cheng)。與(yu)此相(xiang)關(guan)的(de)膠原(yuan)分(fen)(fen)子(zi)自組裝和(he)聚合能力(li)分(fen)(fen)析，可參考相(xiang)關(guan)國內外相(xiang)關(guan)標準進行研究。

3.純度

關于純度的要求可根據醫療器械終產品的用途和(he)用法而確定(ding)。存在二硫(liu)鍵時重組(zu)人源(yuan)(yuan)化(hua)膠原蛋白(bai)可能會形成寡(gua)聚體，且其電泳分子量大小需成倍增加，寡(gua)聚體需視為重組(zu)人源(yuan)(yuan)化(hua)膠原蛋白(bai)而非雜質(zhi)。

4.含量

需建立重(zhong)組(zu)人(ren)源化(hua)膠原蛋白含量(liang)檢測(ce)(ce)方法，含量(liang)以質(zhi)量(liang)/重(zhong)量(liang)或(huo)質(zhi)量(liang)/體積表示。含量(liang)檢測(ce)(ce)可通過液(ye)相(xiang)色譜法（HPLC）、凱氏定氮法、特征多(duo)肽法等(deng)。

5.雜質、污染物和添加劑

對膠原蛋白(bai)材料工(gong)藝相關雜質(zhi)(zhi)以及外源(yuan)(yuan)污染物(wu)等(deng)進行研(yan)究，如：細胞基質(zhi)(zhi)來(lai)源(yuan)(yuan)、細胞培養來(lai)源(yuan)(yuan)和(he)下游工(gong)藝。需對潛(qian)在的工(gong)藝相關雜質(zhi)(zhi)（如宿主(zhu)細胞蛋白(bai)質(zhi)(zhi)、宿主(zhu)細胞DNA、細胞培養殘(can)留物(wu)、下游工(gong)藝的殘(can)留物(wu)等(deng)）進行鑒(jian)別、評估，并進行定性和(he)/或定量分析，并采用適宜的方(fang)法評價其對生(sheng)物(wu)學功能的影(ying)響(xiang)。工(gong)藝相關雜質(zhi)(zhi)來(lai)源(yuan)(yuan)于(yu)生(sheng)產工(gong)藝，可分三大類：來(lai)源(yuan)(yuan)于(yu)細胞基質(zhi)(zhi)、培養基和(he)下游工(gong)藝。細菌(jun)內毒素、微生(sheng)物(wu)限度(du)和(he)無菌(jun)性，是常規的污染物(wu)控制要求。

5.1源于(yu)細胞基(ji)質的雜質 

來(lai)源于(yu)細(xi)胞(bao)基(ji)質(zhi)的(de)(de)(de)雜(za)質(zhi)包(bao)括源于(yu)宿(su)主(zhu)生物(wu)(wu)體的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)/多(duo)肽；核酸（宿(su)主(zhu)細(xi)胞(bao)/載體/總DNA）；多(duo)糖及(ji)病毒(du)。對(dui)于(yu)宿(su)主(zhu)細(xi)胞(bao)蛋(dan)(dan)白(bai)，一(yi)般(ban)需(xu)(xu)用(yong)能檢(jian)(jian)測(ce)出較寬范圍蛋(dan)(dan)白(bai)雜(za)質(zhi)的(de)(de)(de)靈敏(min)的(de)(de)(de)免疫檢(jian)(jian)測(ce)方法。需(xu)(xu)用(yong)不含(han)目的(de)(de)(de)基(ji)因(yin)的(de)(de)(de)生物(wu)(wu)體粗提(ti)物(wu)(wu)，即不含(han)膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)編碼基(ji)因(yin)的(de)(de)(de)生產用(yong)細(xi)胞(bao)，制備(bei)上述試(shi)驗(yan)使用(yong)的(de)(de)(de)多(duo)克隆抗(kang)體。可通過對(dui)膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)材料的(de)(de)(de)直接分析方法（如(ru)雜(za)交技(ji)術法）檢(jian)(jian)測(ce)宿(su)主(zhu)細(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)DNA水平，和/或通過標(biao)記試(shi)驗(yan)（實(shi)驗(yan)室規模）檢(jian)(jian)測(ce)證(zheng)實(shi)通過純化工(gong)藝能去(qu)(qu)除核酸。對(dui)于(yu)有意導(dao)入的(de)(de)(de)病毒(du)，需(xu)(xu)驗(yan)證(zheng)生產工(gong)藝中去(qu)(qu)除/滅活病毒(du)的(de)(de)(de)能力(li)。

5.1.1外源性DNA殘留量

按照《中華人民共和國藥(yao)典》“外(wai)(wai)源性(xing)DNA殘留量測(ce)定(ding)(ding)法”的“熒(ying)光染(ran)(ran)色(se)(se)法”或“定(ding)(ding)量PCR法”進行測(ce)定(ding)(ding)，“熒(ying)光染(ran)(ran)色(se)(se)法”的樣(yang)品(pin)加(jia)(jia)標(biao)回(hui)收率需(xu)(xu)滿足70%～130%；“定(ding)(ding)量PCR法”的樣(yang)品(pin)加(jia)(jia)標(biao)回(hui)收率需(xu)(xu)滿足50%～150%，需(xu)(xu)規(gui)定(ding)(ding)殘留限(xian)(xian)量。如果樣(yang)品(pin)中外(wai)(wai)源性(xing)DNA殘留量低(di)于“熒(ying)光染(ran)(ran)色(se)(se)法”的檢(jian)測(ce)限(xian)(xian)，則需(xu)(xu)采(cai)用“定(ding)(ding)量PCR法”進行測(ce)定(ding)(ding)。

需根據(ju)醫療器(qi)械產品(pin)的預期臨床用途、使用量等，確定(ding)(ding)含(han)重組(zu)人源化膠原蛋白的材料臨床最(zui)大使用量的外(wai)源性(xing)DNA殘(can)留量限值。推薦參考生物制品(pin)外(wai)源性(xing)DNA殘(can)留限量要求(qiu)，結合殘(can)留DNA宿主類型(xing)及其風(feng)險程度(du)設定(ding)(ding)每人每次最(zui)大使用量限值。

建議參(can)考生物(wu)制(zhi)品中大腸桿菌或酵母菌表達的基因工程重組(zu)生物(wu)制(zhi)品的外(wai)源性DNA殘留量限度。

5.1.2宿主細胞蛋白質殘留量

5.1.2.1大腸桿菌蛋白質殘留量

按照《中華人民共和國(guo)藥典》“大腸埃希菌菌體蛋白質(zhi)殘(can)留(liu)量測定法(fa)”或采用經驗證的(de)酶聯(lian)免疫(yi)試劑盒進(jin)行(xing)測定。

5.1.2.2酵母蛋(dan)白質殘留量

按照《中華人(ren)民共和國(guo)藥典》“酵母工程菌菌體蛋白質殘留量測定法(fa)”或(huo)采用經驗證的(de)酶(mei)聯免疫試(shi)劑盒進行(xing)測定。

5.1.2.3CHO細胞蛋(dan)白質殘(can)留量

采用經驗證的酶聯(lian)免疫試劑盒進行測定(ding)。

5.1.3促炎(yan)性污(wu)染物(wu)（肽聚糖）

采用經驗證(zheng)的(de)方(fang)法或經驗證(zheng)的(de)市售細菌(jun)肽聚(ju)糖檢(jian)測試劑盒（ELISA）檢(jian)測殘(can)留肽聚(ju)糖，需根據其致熱反應風險規定可接受的(de)限量要求。

5.1.4碳水化合物結構

根據細胞基(ji)質等因素，必要時需考慮測定糖蛋白(bai)中(zhong)碳(tan)水(shui)化合(he)物的(de)(de)含量（中(zhong)性糖、氨(an)基(ji)糖、唾液酸）。此外(wai)，盡可(ke)能(neng)分(fen)析碳(tan)水(shui)化合(he)物的(de)(de)結(jie)構、寡(gua)糖形態（長鏈狀）和多(duo)肽的(de)(de)糖基(ji)化位點。

5.2源于培養(yang)基的雜質(zhi)

來源于培(pei)養基的(de)雜質包(bao)括(kuo)誘(you)導劑（多核苷(gan)酸，病毒）、抗生素(su)(su)(su)、血清及其他培(pei)養基組分。需根據工藝中采用(yong)的(de)表達體(ti)系(xi)和使用(yong)的(de)抗生素(su)(su)(su)類(lei)型(xing)，采用(yong)經驗證的(de)方(fang)法測定殘(can)余抗生素(su)(su)(su)含量/活性，殘(can)余抗生素(su)(su)(su)含量需符合《重組人源化膠原蛋(dan)白》行(xing)業(ye)標(biao)準(zhun)等相關標(biao)準(zhun)，不應有殘(can)余抗生素(su)(su)(su)活性。

殘余抗(kang)生素含量的(de)測(ce)定(ding)(ding)按照YY/T 1849《重(zhong)組(zu)膠原蛋白》中描(miao)述(shu)的(de)方(fang)法或(huo)其他經驗(yan)證(zheng)的(de)方(fang)法進行檢(jian)測(ce)，殘余抗(kang)生素活性按照《中華人民共和(he)國藥典》 四(si)部通(tong)則 生物(wu)活性測(ce)定(ding)(ding)法中抗(kang)生素微生物(wu)檢(jian)定(ding)(ding)法或(huo)《中華人民共和(he)國藥典》 四(si)部通(tong)則 抗(kang)生素殘留量檢(jian)查(cha)法進行檢(jian)測(ce)。

5.3源于下游(you)工藝產生的雜質

來源(yuan)于下游工藝產(chan)生的雜質(zhi)一般包括酶、化(hua)(hua)學/生化(hua)(hua)處理(li)(li)試劑(ji)（如(ru)(ru)溴化(hua)(hua)氰(qing)、胍、氧化(hua)(hua)劑(ji)和還原劑(ji)）、無機鹽（如(ru)(ru)重金屬、砷、非有色金屬離子）、溶劑(ji)、載體(ti)/配體(ti)（如(ru)(ru)單克隆(long)抗體(ti)），及(ji)其他(ta)可濾(lv)過的物質(zhi)。需結合實(shi)際情況制定相關(guan)理(li)(li)化(hua)(hua)指(zhi)標。

5.3.1添加劑

如(ru)果使用了防(fang)腐劑、凍(dong)干保護劑等(deng)添加劑，需給(gei)出其限量要求和檢測方法。

5.3.2重金屬及微量(liang)元素含量(liang)需(xu)符合以下規定。

5.3.2.1重金屬元素

對工藝中添加的重金屬元素，需(xu)符(fu)合規定(ding)限值。

5.3.2.2重(zhong)金屬含量

重(zhong)金屬總量（以Pb計）需符(fu)合YY/T 1888《重(zhong)組人源化(hua)膠(jiao)原蛋白(bai)》行(xing)業標準(zhun)等相(xiang)關標準(zhun)中的限值。

5.3.2.3微量(liang)(liang)元素(su)含量(liang)(liang)

微量元素含量：砷(shen)（As）、汞（Hg）、鉛（Pb）、鉻（Cr）、鎘（Cd）、銅（Cu）、鉬（Mo）、鐵(tie)（Fe）、鎳（Ni）需符合(he)YY/T 1888《重(zhong)組人(ren)源化膠原蛋白(bai)》等相關(guan)標準中(zhong)的(de)要求。

5.4細菌內毒素

細菌內毒素(su)相關限量要求需(xu)考慮醫療器械(xie)終產品與人體的(de)接觸(chu)方式。

5.5微生物限度

若(ruo)重(zhong)組人源(yuan)化膠原蛋(dan)白材料以(yi)微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)限(xian)度(du)控制狀態提供，按照(zhao)《中華人民共(gong)和(he)(he)國藥典》 四部通則 非無(wu)菌(jun)產品(pin)微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)限(xian)度(du)檢(jian)查：微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)計數法(fa)和(he)(he)非無(wu)菌(jun)產品(pin)微(wei)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)限(xian)度(du)檢(jian)查：控制菌(jun)檢(jian)查法(fa)進行檢(jian)測(ce)，結果需(xu)符合相關要求。

5.6無菌

若重(zhong)組人(ren)源化膠原蛋(dan)白(bai)材料以(yi)無菌狀(zhuang)態提供，按(an)照《中華人(ren)民共和國藥典》 四部通則 無菌檢(jian)查(cha)法進行檢(jian)測，結(jie)果需(xu)無菌。

5.7分子變異體

需對重組(zu)人源化膠(jiao)原蛋(dan)(dan)白(bai)材料(liao)的(de)各種(zhong)分(fen)(fen)子變(bian)異體(ti)進(jin)行分(fen)(fen)離、鑒別(bie)和分(fen)(fen)析(xi)。如變(bian)異體(ti)的(de)功能(neng)與目標產(chan)物(wu)一致(zhi)時可不做雜(za)質考慮(lv)。需考慮(lv)在生(sheng)產(chan)和/或貯存期間(jian)膠(jiao)原蛋(dan)(dan)白(bai)材料(liao)降解產(chan)物(wu)是(shi)否顯著(zhu)增加及其與免疫(yi)原性(xing)的(de)相(xiang)關性(xing)。以下為最常見的(de)目的(de)膠(jiao)原蛋(dan)(dan)白(bai)材料(liao)的(de)分(fen)(fen)子變(bian)異體(ti)，并列出了相(xiang)應的(de)檢測方法。

5.7.1化學修(xiu)飾類型

各(ge)種非預(yu)期(qi)的(de)(de)(de)翻譯后修飾(shi)(shi)是導(dao)致重組(zu)蛋白異(yi)質(zhi)(zhi)性的(de)(de)(de)重要質(zhi)(zhi)量問題，如(ru)：脫酰胺化、氧化、糖譜(pu)(pu)/糖基化修飾(shi)(shi)等(deng)(deng)和(he)其他可能(neng)(neng)的(de)(de)(de)N端(duan)、C端(duan)修飾(shi)(shi)（如(ru)乙酰化、酰胺化或者由(you)于外肽酶導(dao)致的(de)(de)(de)部分(fen)降解以(yi)及C端(duan)加工、N端(duan)焦(jiao)谷氨(an)酸(suan)等(deng)(deng)），以(yi)及各(ge)種其他異(yi)質(zhi)(zhi)性（如(ru)異(yi)構(gou)化、碎片化、二(er)硫鍵錯(cuo)配(pei)、N-連接和(he)O-連接的(de)(de)(de)寡糖、聚集(ji)等(deng)(deng)）。適用時(shi)，需(xu)(xu)按YY/T 1849《重組(zu)膠原蛋白》中的(de)(de)(de)要求，參照《重組(zu)膠原蛋白肽圖(tu)指紋(wen)圖(tu)譜(pu)(pu)分(fen)析》行業標準等(deng)(deng)相關(guan)標準進(jin)行分(fen)析。需(xu)(xu)考慮(lv)脫酰胺、異(yi)構(gou)化、錯(cuo)配(pei)二(er)硫鍵連接和(he)氧化形式的(de)(de)(de)分(fen)離和(he)鑒(jian)別。對這些(xie)變異(yi)體的(de)(de)(de)分(fen)離和(he)鑒(jian)別，可采用層析法、電(dian)(dian)泳法（如(ru)毛(mao)細管電(dian)(dian)泳）、質(zhi)(zhi)譜(pu)(pu)法和(he)/或光譜(pu)(pu)法（如(ru)圓(yuan)二(er)色譜(pu)(pu)）。需(xu)(xu)注意在修飾(shi)(shi)不會(hui)引起或只引起較小(xiao)的(de)(de)(de)分(fen)子量變化及結(jie)構(gou)變化的(de)(de)(de)情(qing)況下，這些(xie)方(fang)法可能(neng)(neng)無法鑒(jian)別。此(ci)時(shi)，需(xu)(xu)要結(jie)合功能(neng)(neng)性試(shi)驗，評價所發生的(de)(de)(de)修飾(shi)(shi)是否影(ying)響預(yu)期(qi)的(de)(de)(de)功能(neng)(neng)和(he)使用。

5.7.2降解物和聚合體

降(jiang)解物和(he)聚(ju)合(he)(he)體(ti)：聚(ju)合(he)(he)體(ti)包括二聚(ju)體(ti)和(he)多聚(ju)體(ti)，可用分(fen)子篩(shai)層(ceng)析法（如(ru)SE-HPLC）進行定量；需建(jian)立(li)成(cheng)品中非預期(qi)降(jiang)解物的判定標準，并對穩定性試(shi)驗產生的降(jiang)解產物進行監測。

6.熱穩定性

如果重組(zu)人源(yuan)化(hua)膠原蛋白是多聚體(ti)，可(ke)采用(yong)差示掃描量熱分析（DSC）進(jin)行解聚溫度分析。可(ke)參考(kao)《中華(hua)人民共和(he)國藥典》 四部。

如果是單鏈(lian)的蛋(dan)白肽(tai)，可參考《中(zhong)華(hua)人(ren)民(min)共和國藥典》 四部，人(ren)免(mian)疫球蛋(dan)白3.3.2.4熱穩定性試(shi)(shi)驗，將供(gong)試(shi)(shi)品置（57±0.5）℃水浴中(zhong)保溫4h后，用(yong)可見異物(wu)檢查裝(zhuang)置，肉眼觀察需(xu)無凝膠化或絮狀物(wu)。

7.其它理化指標

膠原蛋白(bai)材料其(qi)它性能(neng)指標宜根據醫療器械終產品特(te)性及相關通用(yong)要求制定，在適用(yong)時(shi)，需對相關性能(neng)指標檢(jian)測方法使用(yong)的(de)參(can)比品進(jin)行(xing)性能(neng)研(yan)究，對照品技(ji)術參(can)數需明確且性能(neng)穩定。用(yong)于(yu)(yu)理化測定等方面的(de)參(can)比品，需進(jin)行(xing)必要的(de)分析(xi)鑒定，包括但不(bu)限(xian)于(yu)(yu)：

7.1外觀（如性狀、顏色）

用肉眼直接觀測，需為白(bai)(bai)色(se)(se)/淡黃色(se)(se)/無色(se)(se)透明(ming)液體或凝膠，或白(bai)(bai)色(se)(se)/類白(bai)(bai)色(se)(se)凍干粉(fen)或海綿狀固體。

注：隨著行業發展，可能存在(zai)其(qi)他(ta)外觀要求，需根據原材料(liao)具體形態規(gui)定外觀要求。

7.2可見異物

按(an)照《中華人民共和國藥典》 四部通則 可見異(yi)物(wu)檢(jian)(jian)查法第一法（燈檢(jian)(jian)法）進行檢(jian)(jian)測，需無明顯異(yi)物(wu)。

7.3溶解性

需根據供試品(pin)的(de)溶(rong)解特(te)性，對供試品(pin)在水(shui)、稀酸或(huo)中性鹽溶(rong)液中的(de)溶(rong)解程度進行表征和闡述。

7.4水分

適用時（如凍干樣品），需明確水分含量。除另有(you)規定(ding)外，取供試品約1g～2g，按照《中華(hua)(hua)人(ren)(ren)民共和國藥(yao)典》“水分測(ce)定(ding)法(fa)”第(di)二法(fa)（烘干法(fa)）測(ce)定(ding)，或(huo)取供試品約10mg按照《中華(hua)(hua)人(ren)(ren)民共和國藥(yao)典》“熱分析法(fa)”熱重(zhong)法(fa)（TG）測(ce)定(ding)，升溫程序：從室溫以10℃/min速率(lv)升溫至105℃，保(bao)持(chi)60min。減失重(zhong)量需符(fu)合所標示范圍。規定(ding)仲裁方(fang)法(fa)為水分測(ce)定(ding)法(fa)。

7.5熾灼殘渣

除(chu)另有規定外，取1.0-2.0g，按照(zhao)《中(zhong)華人民共和國藥典(dian)》 四部通則 熾(chi)灼殘渣檢(jian)查(cha)法進行(xing)檢(jian)測(ce)。

7.6酸堿度

液體(ti)和凝膠樣品直接取(qu)樣，固體(ti)樣品用生理鹽水稀釋為1mg/mL，按照《中華人(ren)民(min)共(gong)和國藥典》 四部通則“pH值測定法”進行(xing)檢測，需符合所標示值的(de)±1.0。

7.7滲(shen)透壓摩爾濃度(du)

適用(yong)時，液體(ti)和(he)凝膠(jiao)樣品直接取樣，固體(ti)樣品用(yong)生理鹽(yan)水稀釋為1mg/mL按照《中華人(ren)民共(gong)和(he)國(guo)藥典(dian)》 四部通(tong)則(ze) 滲透壓(ya)摩爾(er)(er)濃(nong)度測(ce)定(ding)法進行檢測(ce)，滲透壓(ya)摩爾(er)(er)濃(nong)度范圍(wei)需符合相(xiang)關標準要求。

7.8動力黏度（凝膠）

取供試品按照《中(zhong)華人民共(gong)和國藥典》“黏度測定(ding)(ding)法(fa)”的“旋轉黏度計測定(ding)(ding)法(fa)”測定(ding)(ding)，需(xu)要詳細描述(shu)試驗(yan)條件(jian)，動力黏度值需(xu)符合所標示范圍。

7.9裝量及差異

根據供試品(pin)性狀（溶液、凝(ning)膠(jiao)、凍(dong)干海綿或凍(dong)干粉(fen)末等）和裝量(liang)(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)不(bu)(bu)(bu)同確(que)定裝量(liang)(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)允差要求。例如：20g（mL）以(yi)下，單(dan)個(ge)裝量(liang)(liang)(liang)(liang)(liang)不(bu)(bu)(bu)低(di)于標(biao)示裝量(liang)(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)93%；20g（mL）至50g（mL），單(dan)個(ge)裝量(liang)(liang)(liang)(liang)(liang)不(bu)(bu)(bu)低(di)于標(biao)示裝量(liang)(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)95%；50g（mL）以(yi)上，單(dan)個(ge)裝量(liang)(liang)(liang)(liang)(liang)不(bu)(bu)(bu)低(di)于標(biao)示裝量(liang)(liang)(liang)(liang)(liang)的(de)(de)97%；平均裝量(liang)(liang)(liang)(liang)(liang)不(bu)(bu)(bu)低(di)于標(biao)示裝量(liang)(liang)(liang)(liang)(liang)。

8.降解特性及產物

需對膠原(yuan)蛋白材料降(jiang)解特(te)性進(jin)行研究，可采(cai)用凝膠滲透色譜(pu)（GPC）測定降(jiang)解產物的分(fen)(fen)子(zi)量(liang)分(fen)(fen)布及分(fen)(fen)子(zi)量(liang)，水解/酶(mei)解產物可使用氨基酸(suan)分(fen)(fen)析儀、高效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)或其(qi)他適宜的方(fang)法測定。

9.生物學功能評價

重(zhong)組膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)的(de)(de)生(sheng)(sheng)物學功能是指以重(zhong)組膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)生(sheng)(sheng)物學特(te)性(xing)(xing)相關屬性(xing)(xing)為基礎的(de)(de)生(sheng)(sheng)物學作用，對聲稱的(de)(de)生(sheng)(sheng)物學功能宜進(jin)行(xing)定性(xing)(xing)定量分析(xi)。膠(jiao)原(yuan)是細(xi)胞(bao)(bao)外基質的(de)(de)主要成(cheng)分，重(zhong)組人(ren)源(yuan)(yuan)化(hua)膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)作為重(zhong)組膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)的(de)(de)一種，其主要生(sheng)(sheng)物學功能也同樣(yang)是為細(xi)胞(bao)(bao)提供支架和良(liang)好的(de)(de)微環境，如促進(jin)細(xi)胞(bao)(bao)黏附(fu)、增殖、生(sheng)(sheng)長、分化(hua)等。因此(ci)，可(ke)通過評價細(xi)胞(bao)(bao)-膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)相互作用來評價重(zhong)組人(ren)源(yuan)(yuan)化(hua)膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)的(de)(de)生(sheng)(sheng)物學功能。細(xi)胞(bao)(bao)增殖、分化(hua)、黏附(fu)性(xing)(xing)、遷移或移行(xing)評價方(fang)法(fa)可(ke)參考YY/T 1849《重(zhong)組膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)》。

由于膠原類(lei)材料在(zai)分(fen)子組(zu)成、微結構、物理性(xing)能(neng)方面可(ke)(ke)能(neng)差異顯著(zhu)，需檢測材料與細胞之間相互作用(yong)及其引導(dao)細胞基礎響應(ying)的性(xing)能(neng)。細胞響應(ying)的參(can)數包(bao)括細胞形態、面積和體積，均可(ke)(ke)通過(guo)二(er)維(wei)(wei)（2D）或三(san)維(wei)(wei)（3D）圖像技術可(ke)(ke)視化(hua)評價，還(huan)包(bao)括存活率、增殖率、程序化(hua)凋亡以及遷(qian)移。

鼓勵對重(zhong)組人源化(hua)膠(jiao)原(yuan)蛋白對細胞(bao)(bao)的(de)(de)作(zuo)用機(ji)理進行研究(jiu)。例如，抗體阻斷(duan)試(shi)驗(yan)可用來確定(ding)細胞(bao)(bao)表面的(de)(de)何(he)種(zhong)受體參(can)與了與膠(jiao)原(yuan)的(de)(de)作(zuo)用，如整合素或盤狀(zhuang)結(jie)構(gou)域受體（DDRs）。此(ci)外，細胞(bao)(bao)骨架成(cheng)分(fen)（如肌動蛋白）的(de)(de)協同作(zuo)用也可用來評價(jia)細胞(bao)(bao)與基質間的(de)(de)粘附與收縮(suo)解(jie)離(li)。有(you)多(duo)種(zhong)在單(dan)細胞(bao)(bao)或多(duo)細胞(bao)(bao)水平上評價(jia)細胞(bao)(bao)引導的(de)(de)收縮(suo)解(jie)離(li)的(de)(de)方法，包括(kuo)自由漂浮組織構(gou)建物的(de)(de)尺寸(cun)隨時間的(de)(de)變化(hua)、施加在培(pei)養(yang)-力學監(jian)測(ce)系統(tong)上力的(de)(de)大(da)小，以及單(dan)個細胞(bao)(bao)在膠(jiao)原(yuan)網絡的(de)(de)應力和形變等。

其它適用于(yu)干(gan)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)和祖(zu)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)類型(xing)的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)-膠(jiao)原相互(hu)作用的(de)功能性檢(jian)測(ce)包括細(xi)胞(bao)(bao)(bao)株的(de)定(ding)(ding)(ding)向分(fen)化，特定(ding)(ding)(ding)干(gan)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)或祖(zu)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)增(zeng)殖，或組織形態發生(sheng)(sheng)（始于(yu)內皮祖(zu)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)血(xue)管形成）。按照(zhao)《中華人民共和國藥典》 四部 進行成纖(xian)維(wei)(wei)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)生(sheng)(sheng)長因子生(sheng)(sheng)物學活性測(ce)定(ding)(ding)(ding)，對膠(jiao)原蛋白(bai)肽-細(xi)胞(bao)(bao)(bao)相互(hu)作用評價(jia)，反映(ying)膠(jiao)原蛋白(bai)肽與成纖(xian)維(wei)(wei)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)增(zeng)殖的(de)構效(xiao)關系。

按照(zhao)《中(zhong)華(hua)人民共和(he)國藥典》 四部 生物(wu)活(huo)性測定法(fa)對(dui)試驗結果進(jin)(jin)行(xing)統計(ji)學分(fen)(fen)析(xi)，包括對(dui)驗證指標(biao)結果的(de)(de)繪圖(tu)和(he)統計(ji)學分(fen)(fen)析(xi)，以及判斷其(qi)(qi)是否符合可(ke)接(jie)受標(biao)準(zhun)等(deng)。常規的(de)(de)統計(ji)學方(fang)法(fa)一般要(yao)求數(shu)據(ju)之間相互獨立，并呈(cheng)近(jin)似正(zheng)態分(fen)(fen)布(bu)和(he)方(fang)差齊性，通常采(cai)用相對(dui)效價的(de)(de)對(dui)數(shu)轉換(huan)值進(jin)(jin)行(xing)數(shu)據(ju)分(fen)(fen)析(xi)。當無(wu)法(fa)滿足上述(shu)統計(ji)學要(yao)求時，也可(ke)考(kao)慮采(cai)用其(qi)(qi)他適(shi)宜(yi)的(de)(de)替(ti)代(dai)方(fang)法(fa)進(jin)(jin)行(xing)數(shu)據(ju)分(fen)(fen)析(xi)。

上述關于膠原—細(xi)胞相互作(zuo)用的功(gong)能性(xing)(xing)測(ce)定也可作(zuo)為醫療(liao)(liao)器(qi)械(xie)產品(pin)標準化和質量(liang)控(kong)制的方法。三維支架材(cai)料(liao)中細(xi)胞活(huo)性(xing)(xing)評價方法可參考YY/T 1562《組織(zhi)工程醫療(liao)(liao)器(qi)械(xie)產品(pin) 生(sheng)物材(cai)料(liao)支架 細(xi)胞活(huo)性(xing)(xing)試驗(yan)指南》。

（二） 材(cai)料免疫(yi)學安全性研究

臨床前(qian)安(an)(an)全性(xing)評價包括臨床前(qian)安(an)(an)全性(xing)試驗(yan)，其(qi)目的(de)主要是(shi)(shi)確(que)定新膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)材料是(shi)(shi)否會在人(ren)體(ti)(ti)引起未能預料的(de)不(bu)良(liang)反應(ying)，免(mian)疫學(xue)安(an)(an)全性(xing)研(yan)究(jiu)(jiu)是(shi)(shi)重組人(ren)源化膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)材料生(sheng)物(wu)(wu)安(an)(an)全性(xing)研(yan)究(jiu)(jiu)資料的(de)主體(ti)(ti)。但是(shi)(shi)，用傳統(tong)生(sheng)物(wu)(wu)試驗(yan)方法(fa)來評價重組人(ren)源化膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)往往有困難，并受(shou)多(duo)種因素的(de)影響。例(li)如高度(du)的(de)種屬特異性(xing)，人(ren)的(de)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)對(dui)人(ren)的(de)生(sheng)物(wu)(wu)學(xue)活性(xing)遠高于對(dui)動物(wu)(wu)的(de)活性(xing)，而(er)且人(ren)的(de)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)氨基酸序列，常常與來自其(qi)它(ta)種系的(de)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)不(bu)同，例(li)如糖基。因而(er)由(you)基因工程技術所(suo)制備的(de)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)或肽類往往會在人(ren)體(ti)(ti)以外的(de)其(qi)它(ta)宿主中產(chan)生(sheng)免(mian)疫應(ying)答，其(qi)生(sheng)物(wu)(wu)學(xue)效(xiao)應(ying)有所(suo)改變，并可能因形成免(mian)疫復合物(wu)(wu)而(er)導致有毒性(xing)反應(ying)，而(er)這(zhe)樣產(chan)生(sheng)的(de)毒性(xing)反應(ying)與人(ren)體(ti)(ti)安(an)(an)全性(xing)顯然無關。

另外(wai)，由于(yu)重組(zu)人源化(hua)膠(jiao)(jiao)原蛋(dan)(dan)白功(gong)能、生產(chan)工(gong)藝或者(zhe)膠(jiao)(jiao)原蛋(dan)(dan)白材(cai)料(liao)(liao)穩(wen)定性等(deng)要求，對膠(jiao)(jiao)原蛋(dan)(dan)白材(cai)料(liao)(liao)進行修飾或者(zhe)改(gai)(gai)構，需提供與(yu)未修飾或者(zhe)改(gai)(gai)構材(cai)料(liao)(liao)比較(jiao)的研(yan)究資(zi)料(liao)(liao)。以簡(jian)化(hua)生產(chan)工(gong)藝為目的而引入的額外(wai)多肽片(pian)段如His-tag，在最終的材(cai)料(liao)(liao)成品中需符(fu)合相(xiang)關行業標準的要求。

1.免(mian)疫(yi)原(yuan)及免(mian)疫(yi)化學檢(jian)驗

基于部分人膠原(yuan)(yuan)蛋(dan)白(bai)核酸序(xu)列進(jin)(jin)行(xing)編輯(ji)組合而重組的(de)(de)(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)產物(wu)(wu)，特別是長期反復使用(yong)時，可(ke)能引(yin)起人體預測不到的(de)(de)(de)免疫(yi)(yi)原(yuan)(yuan)性。因(yin)此，不能完全排除其免疫(yi)(yi)原(yuan)(yuan)性風險，宜增(zeng)加(jia)免疫(yi)(yi)學研(yan)究。重組人源(yuan)化膠原(yuan)(yuan)蛋(dan)白(bai)作為(wei)醫療器械(xie)用(yong)原(yuan)(yuan)材料，可(ke)采用(yong)適宜方法進(jin)(jin)行(xing)免疫(yi)(yi)學評(ping)(ping)價(jia)(jia)。若用(yong)動(dong)(dong)物(wu)(wu)進(jin)(jin)行(xing)免疫(yi)(yi)學試驗，可(ke)能因(yin)為(wei)動(dong)(dong)物(wu)(wu)模型與臨床(chuang)應用(yong)之間存在種屬差異，帶來對(dui)評(ping)(ping)價(jia)(jia)試驗結果或評(ping)(ping)價(jia)(jia)試驗數據(ju)使用(yong)上的(de)(de)(de)局限，需要根(gen)據(ju)臨床(chuang)評(ping)(ping)價(jia)(jia)獲得(de)的(de)(de)(de)免疫(yi)(yi)學評(ping)(ping)價(jia)(jia)數據(ju)及動(dong)(dong)物(wu)(wu)模型獲得(de)的(de)(de)(de)免疫(yi)(yi)評(ping)(ping)價(jia)(jia)數據(ju)進(jin)(jin)行(xing)綜合評(ping)(ping)價(jia)(jia)分析。

患者對蛋白(bai)質類材料(liao)產生(sheng)(sheng)(sheng)免疫(yi)應答的風險(xian)將隨醫療(liao)器械產品(pin)變化(hua)(hua)而(er)變化(hua)(hua)。建議(yi)采(cai)用基于風險(xian)的方法來評價和減輕(qing)與影響人源化(hua)(hua)膠原(yuan)(yuan)蛋白(bai)安(an)全性(xing)(xing)和有(you)效性(xing)(xing)相關的免疫(yi)應答。人源化(hua)(hua)膠原(yuan)(yuan)免疫(yi)原(yuan)(yuan)主要(yao)源自(zi)生(sheng)(sheng)(sheng)產過程(cheng)中(zhong)殘留(liu)(liu)的可致免疫(yi)原(yuan)(yuan)性(xing)(xing)的各(ge)種因(yin)子，包括殘留(liu)(liu)的各(ge)種雜(za)蛋白(bai)（包括DNA轉(zhuan)錄過程(cheng)中(zhong)可能產生(sheng)(sheng)(sheng)的異種蛋白(bai)）、殘留(liu)(liu)的大腸桿菌(jun)及酵母菌(jun)外源性(xing)(xing)DNA、材料(liao)致熱(re)原(yuan)(yuan)、生(sheng)(sheng)(sheng)產過程(cheng)中(zhong)菌(jun)體產生(sheng)(sheng)(sheng)的細(xi)菌(jun)內毒素、DAMPs以及人源膠原(yuan)(yuan)特異性(xing)(xing)免疫(yi)等等。

為降(jiang)(jiang)低(di)人(ren)源化膠原(yuan)(yuan)蛋白材料的(de)免(mian)(mian)疫原(yuan)(yuan)性(xing)風險，一般(ban)需(xu)在材料設(she)計及生產工藝中采取相應處理措施以降(jiang)(jiang)低(di)其免(mian)(mian)疫原(yuan)(yuan)性(xing)，如宿主細胞(bao)選擇，蛋白提(ti)取、蛋白純化。注冊申請人(ren)需(xu)對其降(jiang)(jiang)低(di)材料免(mian)(mian)疫原(yuan)(yuan)性(xing)的(de)有效性(xing)進行(xing)驗(yan)證(zheng)，并提(ti)供(gong)驗(yan)證(zheng)試驗(yan)性(xing)數據(ju)(ju)或相關研究(jiu)資料。注冊申請人(ren)需(xu)提(ti)供(gong)免(mian)(mian)疫原(yuan)(yuan)性(xing)檢測范例的(de)理論依據(ju)(ju)，需(xu)使用經(jing)完全(quan)驗(yan)證(zheng)的(de)檢測法對來自關鍵(jian)性(xing)研究(jiu)的(de)樣(yang)品進行(xing)檢測，并提(ti)供(gong)支持(chi)該檢測法的(de)全(quan)面驗(yan)證(zheng)的(de)數據(ju)(ju)。

雜蛋(dan)白(bai)的(de)檢(jian)測(ce)(ce)可參考(kao)(kao)YY/T 1453《組(zu)織工(gong)程醫(yi)(yi)療(liao)器械產品(pin)(pin) I型膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)表征方法(fa)(fa)(fa)》，外(wai)源(yuan)性(xing)DNA檢(jian)測(ce)(ce)可參考(kao)(kao)YY/T 0606.25《組(zu)織工(gong)程醫(yi)(yi)療(liao)產品(pin)(pin) 第(di)25部(bu)分 動物源(yuan)性(xing)生(sheng)物材(cai)料DNA殘留量測(ce)(ce)定法(fa)(fa)(fa)：熒光(guang)染色法(fa)(fa)(fa)》。膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)材(cai)料的(de)免(mian)(mian)疫(yi)原檢(jian)驗可通過(guo)流式細(xi)胞(bao)(bao)術（FCM）或酶聯免(mian)(mian)疫(yi)吸(xi)附法(fa)(fa)(fa)（ELISA）測(ce)(ce)定，檢(jian)測(ce)(ce)試(shi)(shi)驗宜考(kao)(kao)慮，但(dan)不(bu)限于(yu)淋巴細(xi)胞(bao)(bao)增殖(zhi)試(shi)(shi)驗（YY/T 0606.15《組(zu)織工(gong)程醫(yi)(yi)療(liao)產品(pin)(pin) 第(di)15部(bu)分 評(ping)價基質(zhi)及支架免(mian)(mian)疫(yi)反(fan)應的(de)試(shi)(shi)驗方法(fa)(fa)(fa)：淋巴細(xi)胞(bao)(bao)增殖(zhi)試(shi)(shi)驗》）、細(xi)胞(bao)(bao)遷移試(shi)(shi)驗（YY/T 0606.20《組(zu)織工(gong)程醫(yi)(yi)療(liao)產品(pin)(pin) 第(di)20部(bu)分：評(ping)價基質(zhi)及支架免(mian)(mian)疫(yi)反(fan)應的(de)試(shi)(shi)驗方法(fa)(fa)(fa)：細(xi)胞(bao)(bao)遷移試(shi)(shi)驗》），采用非標方法(fa)(fa)(fa)時需進(jin)行(xing)方法(fa)(fa)(fa)學驗證。

免(mian)疫原(yuan)(yuan)性檢(jian)測(ce)可(ke)設計為檢(jian)測(ce)不期望(wang)的(de)生物或(huo)生理結果(guo)的(de)抗體，重(zhong)組人源化膠原(yuan)(yuan)蛋白抗體可(ke)能降低效果(guo)或(huo)者(zhe)引起過敏等反(fan)應。抗體檢(jian)測(ce)的(de)免(mian)疫原(yuan)(yuan)試驗可(ke)參考(kao)《中華人民共和國藥典》，選擇適(shi)宜的(de)方(fang)法進(jin)(jin)行(xing)(xing)，包括橋聯(lian)或(huo)均相(xiang)酶免(mian)疫法、放射免(mian)疫沉淀試驗等，并進(jin)(jin)行(xing)(xing)相(xiang)關的(de)方(fang)法開發和試驗驗證(zheng)。試驗過程中，可(ke)根據滴度試驗和中和活(huo)性試驗進(jin)(jin)一步對ADA進(jin)(jin)行(xing)(xing)分析，還可(ke)進(jin)(jin)行(xing)(xing)額外(wai)的(de)抗體特(te)征分析，包括抗體分型、抗原(yuan)(yuan)表位鑒(jian)定(ding)及交叉反(fan)應評(ping)價。

篩選檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)（也稱為結合抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)（BAb）檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)）用于檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)與材料(liao)(liao)結合的(de)所有(you)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)。使用確證性(xing)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)建立BAb對(dui)材料(liao)(liao)的(de)特異(yi)性(xing)，使用滴(di)(di)定和(he)(he)(he)(he)中(zhong)和(he)(he)(he)(he)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)進(jin)一步表征重(zhong)組人源化(hua)膠原(yuan)蛋白抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)。使用滴(di)(di)定檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)表征抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)應答的(de)量(liang)級(ji)，抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)對(dui)安全(quan)性(xing)和(he)(he)(he)(he)有(you)效(xiao)性(xing)的(de)影響可(ke)(ke)能與其滴(di)(di)度和(he)(he)(he)(he)持續性(xing)而(er)(er)不(bu)是(shi)(shi)發生(sheng)(sheng)率(lv)相(xiang)關。中(zhong)和(he)(he)(he)(he)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)評估(gu)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)干擾材料(liao)(liao)-靶標(biao)相(xiang)互(hu)作用的(de)能力(li)。中(zhong)和(he)(he)(he)(he)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)（NAb）是(shi)(shi)BAb的(de)亞類(lei)，ADA對(dui)安全(quan)性(xing)和(he)(he)(he)(he)有(you)效(xiao)性(xing)的(de)影響可(ke)(ke)能與NAb活(huo)性(xing)而(er)(er)不(bu)是(shi)(shi)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)發生(sheng)(sheng)率(lv)相(xiang)關。類(lei)似(si)地，在一些(xie)情況下可(ke)(ke)能重(zhong)要的(de)是(shi)(shi)確定NAb滴(di)(di)度。用于檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)的(de)首選檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)應當是(shi)(shi)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)低親和(he)(he)(he)(he)力(li)和(he)(he)(he)(he)高親和(he)(he)(he)(he)力(li)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)的(de)高靈敏度篩選檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)。注冊申請(qing)人在開(kai)發檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)方法(fa)(fa)以確認重(zhong)組人源化(hua)膠原(yuan)蛋白特異(yi)性(xing)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)結合時(shi)，需選擇合適的(de)確證性(xing)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)法(fa)(fa)以防止抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)假陽性(xing)數(shu)據，這些(xie)假陽性(xing)數(shu)據會混淆抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)對(dui)安全(quan)性(xing)和(he)(he)(he)(he)有(you)效(xiao)性(xing)影響的(de)分析。

注(zhu)冊(ce)申請(qing)人需提供支持該檢(jian)(jian)測(ce)(ce)法的全面驗證的數(shu)(shu)據。驗證包(bao)括(kuo)證明用于(yu)給定樣品(pin)中(zhong)抗(kang)體(ti)的定量(liang)測(ce)(ce)量(liang)的特定檢(jian)(jian)測(ce)(ce)法對(dui)于(yu)預期(qi)用途(tu)是可靠(kao)和可重現的。抗(kang)體(ti)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)法有(you)助(zhu)于(yu)評價材料的免疫原性(xing)(xing)，然(ran)而抗(kang)體(ti)的檢(jian)(jian)測(ce)(ce)依賴于(yu)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)法的關(guan)鍵操作參數(shu)(shu)（如(ru)靈敏度、專屬性(xing)(xing)），一般來說，建議注(zhu)冊(ce)申請(qing)人開發針對(dui)靈敏度、專屬性(xing)(xing)、選擇性(xing)(xing)、精確度、重復性(xing)(xing)和穩定性(xing)(xing)進行優化后的檢(jian)(jian)測(ce)(ce)法。

其(qi)他的免疫原(yuan)評價(jia)及(ji)生(sheng)物(wu)學性(xing)能及(ji)生(sheng)物(wu)相容性(xing)評價(jia)等(deng)(deng)建議做醫療器械終(zhong)(zhong)產品的檢測，因(yin)為加工(gong)(gong)工(gong)(gong)藝(yi)不同最(zui)終(zhong)(zhong)產品性(xing)能不同，例如有些交聯工(gong)(gong)藝(yi)可能會(hui)封閉某些免疫原(yuan)反應(ying)簇等(deng)(deng)等(deng)(deng)。

2.免疫毒理學評價

當擬生產(chan)醫療(liao)器(qi)械免(mian)(mian)疫(yi)(yi)原性風險與(yu)已上市(shi)產(chan)品無可(ke)比性，且無充(chong)分的(de)文獻(xian)數據評(ping)價(jia)其免(mian)(mian)疫(yi)(yi)原性，需進行免(mian)(mian)疫(yi)(yi)毒(du)理學試驗研究(jiu)。通過免(mian)(mian)疫(yi)(yi)毒(du)理學試驗，對炎癥反應、免(mian)(mian)疫(yi)(yi)抑制、免(mian)(mian)疫(yi)(yi)刺激、超敏反應以及自身(shen)免(mian)(mian)疫(yi)(yi)進行確證(zheng)評(ping)價(jia)，評(ping)估免(mian)(mian)疫(yi)(yi)系統改變導致的(de)潛(qian)在人體不(bu)良健康作用(yong)。

免(mian)疫毒理學(xue)可通過流式細胞(bao)術（FCM）、酶(mei)聯免(mian)疫吸附法(fa)(fa)（ELISA）、組織病理切(qie)片等方(fang)法(fa)(fa)測定，試驗(yan)方(fang)法(fa)(fa)可考慮(lv)結合生物學(xue)試驗(yan)、體(ti)外T淋巴(ba)細胞(bao)轉化(hua)試驗(yan)（YY/T 1465.1《醫療器械免(mian)疫原性(xing)評價(jia)方(fang)法(fa)(fa) 第1部分 體(ti)外T淋巴(ba)細胞(bao)轉化(hua)試驗(yan)》）等，注冊申請人需(xu)對選(xuan)用檢測方(fang)法(fa)(fa)的適(shi)用性(xing)進行(xing)評價(jia)，采(cai)用非標方(fang)法(fa)(fa)時需(xu)進行(xing)方(fang)法(fa)(fa)學(xue)驗(yan)證。

可參考GB/T 16886.20《醫療器械免(mian)(mian)疫毒理(li)學試(shi)(shi)驗原則和(he)方法(fa)》選(xuan)擇性進(jin)行功(gong)(gong)能(neng)性或非功(gong)(gong)能(neng)性免(mian)(mian)疫毒理(li)學試(shi)(shi)驗，通(tong)過嚙齒動(dong)物試(shi)(shi)驗方式檢測和(he)評(ping)價(jia)物質的(de)不良作用。目前主要研究方法(fa)是將醫療器械/材(cai)料(liao)植入(ru)小鼠(shu)/模式小鼠(shu)，然后研究器械/材(cai)料(liao)整個降解周(zhou)期(qi)內機(ji)體的(de)體液和(he)細(xi)(xi)胞的(de)免(mian)(mian)疫應(ying)(ying)答(da)，以及(ji)局部(bu)組織(zhi)的(de)免(mian)(mian)疫反應(ying)(ying)。功(gong)(gong)能(neng)性檢測測定細(xi)(xi)胞和(he)/或器官(guan)活性，例如淋(lin)(lin)巴(ba)細(xi)(xi)胞對有(you)絲(si)分裂原或特異(yi)性抗原的(de)增殖反應(ying)(ying)、細(xi)(xi)胞毒性和(he)特異(yi)性抗體的(de)形成；非功(gong)(gong)能(neng)性檢測涵蓋形態(tai)學方面和(he)/或定量的(de)術語、淋(lin)(lin)巴(ba)組織(zhi)變化程(cheng)度、淋(lin)(lin)巴(ba)細(xi)(xi)胞數目和(he)免(mian)(mian)疫球蛋(dan)白水平或其(qi)他免(mian)(mian)疫功(gong)(gong)能(neng)標志物。

（三） 材料(liao)生物(wu)學風險評價

作為制(zhi)備(bei)醫療器械產(chan)(chan)(chan)品(pin)的(de)原(yuan)材(cai)料(liao)，需參照GB/T 16886.1的(de)要求對重組人源化(hua)膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)原(yuan)材(cai)料(liao)進行必要的(de)生(sheng)物(wu)學(xue)評(ping)價(jia)，尤其通過膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)材(cai)料(liao)到(dao)醫療器械終(zhong)產(chan)(chan)(chan)品(pin)的(de)加工(gong)工(gong)藝分析發現(xian)，兩(liang)者之(zhi)間(jian)的(de)生(sheng)物(wu)學(xue)風險相近時。如預期用于植入產(chan)(chan)(chan)品(pin)的(de)原(yuan)材(cai)料(liao)，還需評(ping)估樣(yang)品(pin)是否(fou)為內源性凝血(xue)系統激(ji)活物(wu)。若醫療器械終(zhong)產(chan)(chan)(chan)品(pin)與膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)材(cai)料(liao)的(de)使(shi)用方法不一致，需考(kao)慮生(sheng)物(wu)學(xue)補充研究。

根據GB/T 42062《醫療(liao)器械 風(feng)險(xian)管(guan)理(li)對醫療(liao)器械的應用》描(miao)述的風(feng)險(xian)管(guan)理(li)過程進行生物學(xue)風(feng)險(xian)評(ping)(ping)定，識別材料、添加劑、加工助劑和其他潛在可瀝濾物中(zhong)的危(wei)害，接觸劑量(liang)等因(yin)素(su)，繪制(zhi)基(ji)于風(feng)險(xian)管(guan)理(li)的生物學(xue)評(ping)(ping)價流程圖。

如果醫療器械產品以非(fei)滅菌的方式(shi)提供，可將樣品滅菌后用于生(sheng)物(wu)學評價試驗，需考慮滅菌方式(shi)及滅菌對重組人源化膠原蛋白的影響。

可能需要評(ping)價的生物(wu)學風(feng)險評(ping)定終(zhong)點包括但不(bu)限于：

1.細胞毒性

2.致敏性

注射膠原(yuan)、膠原(yuan)止(zhi)血(xue)劑(ji)等(deng)具有(you)潛(qian)在生物(wu)可(ke)降解性(xing)材料，或(huo)體內植(zhi)入材料以(yi)及材料制備過程中新增了化學成分和制造加工(gong)助(zhu)劑(ji)、裝配粘合劑(ji)/溶劑(ji)殘留物(wu)，以(yi)及成品(pin)中可(ke)能存在滅(mie)菌殘留物(wu)或(huo)滅(mie)菌過程所致的反應(ying)性(xing)產(chan)物(wu)時，需進行遲發(fa)型超(chao)敏反應(ying)試驗。

3.皮膚刺激性

4.皮內反應

注射膠原、膠原止血劑(ji)等具(ju)有(you)潛在生物(wu)可降解性材(cai)(cai)料(liao)或體內植入(ru)材(cai)(cai)料(liao)以及材(cai)(cai)料(liao)制備(bei)過(guo)程中新(xin)增化學成(cheng)分和制造加(jia)工(gong)助劑(ji)、裝配(pei)粘合(he)劑(ji)/溶劑(ji)殘(can)留物(wu)以及滅(mie)菌(jun)殘(can)留物(wu)或滅(mie)菌(jun)過(guo)程所致的反應性產物(wu)可能(neng)存在于成(cheng)品時(shi)需進行皮內刺激試驗。

5.材料介導的致熱(re)性

6.全身毒性

7.溶血性

血(xue)管修復材(cai)(cai)料(liao)(liao)、創傷和燒傷修復材(cai)(cai)料(liao)(liao)、膠原(yuan)止(zhi)血(xue)劑、心臟瓣膜等與循環(huan)血(xue)液接觸(chu)的外部接入(ru)(ru)材(cai)(cai)料(liao)(liao)和大部分植(zhi)入(ru)(ru)材(cai)(cai)料(liao)(liao)以及全部植(zhi)入(ru)(ru)血(xue)管系統材(cai)(cai)料(liao)(liao)需(xu)進行溶血(xue)試驗。

8.植入反應

皮下植(zhi)入(ru)(ru)(ru)(ru)（膠原(yuan)(yuan)支架、血管修復(fu)材(cai)料、創傷(shang)和燒(shao)傷(shang)修復(fu)材(cai)料、膠原(yuan)(yuan)止血劑等(deng)可(ke)降解/可(ke)吸收材(cai)料或需植(zhi)入(ru)(ru)(ru)(ru)生物材(cai)料等(deng)需進行(xing)皮下組織(zhi)植(zhi)入(ru)(ru)(ru)(ru)試驗進行(xing)評價）；肌肉植(zhi)入(ru)(ru)(ru)(ru)；骨植(zhi)入(ru)(ru)(ru)(ru)。

9.遺傳毒性。

（四） 穩定(ding)性(xing)(xing)研究與直接(jie)接(jie)觸性(xing)(xing)容器/材料研究

1.穩定性研究

重組人源(yuan)化膠原蛋(dan)白生產過程中間體如(ru)涉及到貯(zhu)存(cun)，則(ze)需開展(zhan)相應的(de)穩(wen)定性(xing)研(yan)究。采用(yong)擬貯(zhu)存(cun)階段樣(yang)(yang)品(pin)的(de)代表性(xing)批次(ci)開展(zhan)研(yan)究，一般包(bao)括貯(zhu)存(cun)、運輸（如(ru)適用(yong)）和使(shi)用(yong)穩(wen)定性(xing)研(yan)究等(deng)。研(yan)究開展(zhan)前，需統籌制定穩(wen)定性(xing)研(yan)究方(fang)案(an)，關注各穩(wen)定性(xing)研(yan)究所用(yong)樣(yang)(yang)品(pin)、直接接觸性(xing)容器(qi)/材(cai)料、檢測(ce)時間點(dian)、檢測(ce)條件和分(fen)析檢項等(deng)。

研(yan)(yan)究中(zhong)(zhong)需(xu)對能(neng)夠(gou)反映(ying)質(zhi)量(liang)變化的(de)(de)敏感特(te)征(zheng)進行研(yan)(yan)究，如含量(liang)、完整性、純(chun)度(du)、微生物安全性和生物學特(te)性等。需(xu)依據(ju)相應的(de)(de)醫療器械產品(pin)的(de)(de)貯存運輸條件開(kai)展研(yan)(yan)究，涵蓋設定的(de)(de)各項條件，如溫度(du)、光(guang)照(zhao)、反復(fu)凍(dong)融（冷凍(dong)貯存時）、振搖等方(fang)面。根據(ju)實際使用情況，開(kai)展使用中(zhong)(zhong)的(de)(de)穩定性研(yan)(yan)究，例(li)如復(fu)溶(rong)或(huo)解凍(dong)、與復(fu)溶(rong)稀釋劑的(de)(de)相容性研(yan)(yan)究等。研(yan)(yan)究中(zhong)(zhong)需(xu)采用與實際使用相同材質(zhi)的(de)(de)直接(jie)(jie)接(jie)(jie)觸(chu)性容器/材料(liao)。

2.直接接觸性容器/材料研究(jiu)

如涉及貯存(cun)，需(xu)對直接(jie)接(jie)觸的包(bao)裝容(rong)(rong)器開展相應的包(bao)材(cai)相容(rong)(rong)性研(yan)究(jiu)。根據相容(rong)(rong)性研(yan)究(jiu)結果，結合穩定(ding)性研(yan)究(jiu)，選(xuan)擇合理的包(bao)裝容(rong)(rong)器。

另外，對制備工藝中(zhong)與樣(yang)品接觸的容(rong)器和(he)一次性(xing)使用(yong)材料(liao)（如(ru)貯(zhu)存袋、過濾(lv)膜、層析介質、管(guan)路等(deng)），需開展(zhan)風(feng)險評估和(he)/或相應的相容(rong)性(xing)研究(jiu)。

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附件：重(zhong)組(zu)人源化膠原蛋白(bai)原材料制造過程(cheng)控制